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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形，樹突狀
傳代特性：屬于高度分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介：
大鼠骨髓樹突狀分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌,、病毒等,；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓,。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大,，脂肪細(xì)胞增多,，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,；樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,，在GM-CSF,、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,，表面皺褶多,，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,，具有較強的遷移能力,，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞，貼壁形態(tài)多樣,。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα,、LPS等誘導(dǎo)而成，多數(shù)呈懸浮生長,， 細(xì)胞呈圓形,，細(xì)胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),，伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞,。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,，主要通過形態(tài)學(xué),、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定,。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80,、CD86等共刺激分子,，進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,，處于啟動,、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強的抗原攝取加工能力,，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,，不能激活T細(xì)胞的第二信號,，可導(dǎo)致T細(xì)胞無能，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受,。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80,、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,，一般在30%以下,。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠骨髓成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定,，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠低密度脂蛋白(LDL)試劑盒 96T/48T
小鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)試劑盒 96T/48T
小鼠蛋酸酯酶2B（PP-2B）試劑盒 96T/48T
小鼠蛋酸酶(PP)試劑盒 96T/48T
小鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human gasic carcinoma marker -CA153ELISA Kit 人癌標(biāo)志物-CA153試劑盒
HumanProteinCELISAKit 人蛋白C(ProteinC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-cailage-aibody試劑盒人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量試劑盒20次
Humanα-Endomorphin,，α-EPELISAKit人α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
白細(xì)胞介素1受體相關(guān)蛋白單克隆抗體
連接粘附分子C抗體
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag 100ugrh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag) 1受體拮抗劑
REG1B重組人 REG1B / PSPS2 蛋白 Protein
EFNA4 Protein Human 重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TNFRSF14 Protein Human 重組人 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag 100ugrh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag) -1受體拮抗劑
EFNA4 Protein Human 重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
TNFRSF14 Protein Human 重組人 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
REG1B重組人 REG1B / PSPS2 蛋白 Protein
大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1B)試劑盒 ,，英文名： IL-1B ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒
MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanomeinELISAKit人網(wǎng)膜素
同位素核酸-蛋白結(jié)合凝膠電泳定量分析(McKay)試劑盒20次
ELISAKitsVCAM-1大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1
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