大鼠骨髓造血干細胞

商品屬性：

細胞簡介：

大鼠骨髓造血干分離自骨髓,；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內,。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌,、病毒等,；某些淋巴細胞能制造抗體。因此,，骨髓不但是造血器官,，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中,，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓,。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大,，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞，最終生成各種血細胞成分,，包括紅細胞,，白細胞和血小板。造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分,。同時在損傷,、炎癥等應激狀態(tài)下，造血干細胞也扮演著調節(jié)和維持體內血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色,。臨床治療中,，造血干細胞移植廣泛應用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病，在其它實體瘤的治療中,，比如淋巴瘤,，生殖細胞瘤，乳腺癌,，小細胞肺癌,，主要應用于常規(guī)治療失敗或復發(fā)難治以及具有不良預后因素的患者,。造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖，一個干細胞分裂產生兩個子細胞,，一個分化為造血祖細胞,，另一個則保持干細胞特征。造血干細胞在不斷體外培養(yǎng)產生大量造血祖細胞同時,，保持自己既不增殖也不分化,。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適，造血干細胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右,。 造血干細胞體外增殖培養(yǎng)需要基質細胞滋養(yǎng)（滋養(yǎng)層細胞）,，缺少滋養(yǎng)層細胞不增殖，無法長期培養(yǎng),，本產品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細胞灌裝發(fā)貨,，不包含滋養(yǎng)層，因此收貨后建議盡快實驗,。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>

　　7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液,；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液,。

　　二,、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗；

　　4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。

方法簡介：

實驗室分離的大鼠骨髓造血干采用沖洗骨髓,、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

實驗室分離的大鼠骨髓造血經CD34免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、EGF、bFGF,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不建議傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

大鼠骨髓造血干體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。

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大鼠骨髓造血干細胞大鼠白細胞介素1α(IL-1α)試劑盒 ，英文名： IL-1α ELISA Kit

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