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大鼠關節(jié)囊成纖維細胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X8234 主要用途 僅供科研研究實驗
大鼠關節(jié)囊成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:鋅指蛋白598抗體 Ran結(jié)合蛋白11抗體 人卵巢上皮細胞 磷酸化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 大鼠胰腺上皮細胞 EYA3蛋白抗體 人心臟纖維原細胞 乙?;D(zhuǎn)移酶14抗體

詳細介紹

大鼠關節(jié)囊成纖維細胞

大鼠關節(jié)囊成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

關節(jié)囊

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

成纖維細胞樣

YS-01X8234

細胞簡介:

大鼠關節(jié)囊成纖維分離自關節(jié)囊組織;關節(jié)囊(articular capsule)是由結(jié)締組織構成的膜囊,,附著于關節(jié)的周圍,,密封關節(jié)腔,。關節(jié)囊的壁共有兩層:外層為纖維層;內(nèi)層為滑膜層,。纖維層實際上是一個連結(jié)骨的骨膜向另一骨骨膜的移行,。纖維層厚而堅韌,由致密結(jié)締組織構成,,含有豐富的血管和神經(jīng),。其淺層纖維多呈縱行排列;深層纖維主要為環(huán)行纖維,。纖維層的厚薄,,各個關節(jié)不相同,即是在同一關節(jié)中,,各部也不一致一般在運動范圍小的或是負重較大的關節(jié)中,,都較厚而緊張,相反,,于運動靈活的關節(jié),,則較薄而松弛。有的關節(jié)囊的部分纖維囊缺如,,僅一層滑膜層,;有的部分明顯增厚,形成韌帶,?;颖《釢櫍怯墒杷山Y(jié)締組織構成,,襯在纖維層內(nèi)面,,周緣附著在關節(jié)軟骨的邊緣。它朝向關節(jié)腔的內(nèi)面光而發(fā)亮,,此面上蓋有一層內(nèi)皮細胞,。滑膜向關節(jié)腔分泌滑液,,滑液是稍粘稠而透明的液體,,可減少關節(jié)中相連骨的摩擦,是一種滑潤劑,?;け砻婵尚纬山q毛或皺襞突入關節(jié)腔內(nèi)。有時滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出,,形成滑膜囊,,常位于肌腱與骨面之間。有時滑膜層突出不明顯,,僅呈深窩狀,,稱為囊狀隱窩,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,;成纖維細胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構,,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團,;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡介:

實驗室分離的大鼠關節(jié)囊成纖維采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠關節(jié)囊成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,,含FBS,、bFGFInsulin,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

大鼠關節(jié)囊成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。

大鼠關節(jié)囊成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

大鼠關節(jié)囊成纖維細胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠低氧誘導因子1α(mouse HIF-1α)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠組胺(mouse HIS)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠肝生素(mouse HGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human papilloma virus aibody IgG (HPV-IgG) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)試劑盒

Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit T細胞急性淋巴母細胞白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgM試劑盒人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物黑色素含量比色法定量試劑盒20

Humanα-enolase,αENOLELISAKit人α烯醇化酶(αENOL)試劑盒規(guī)格:96T/48T

胞漿蛋白SH3GL3抗體

磷酸化14-3-3E蛋白抗體

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽) Protein

神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)

PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein

大鼠關節(jié)囊成纖維細胞大鼠白細胞介素18(IL-18)試劑盒 ,,英文名: IL-18 ELISA Kit

Mouse macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 小鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒

MouseLebtospiraIgGELISAKit 小鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKitNOD樣受體

同位素真菌/酵母細胞蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒20

ELISAKitsLR大鼠可溶性瘦素受體

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;

  2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;

  7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二,、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;

  2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;

  3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;

  4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行


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