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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：大鼠脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源：脊髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS,、EGF、bFGF,、IGF,、VEGF、Heparin,、Hydrocortisone,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
大鼠脊髓微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠脊髓微血管內(nèi)皮分離自脊髓組織,；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù)；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來(lái)處理傳遞信息,。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,，在椎管里面,，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對(duì)的神經(jīng),，分布到四肢,、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū),，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成,；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成,；脊髓是許多簡(jiǎn)單反射的中樞,。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官,。微血管又稱毛細(xì)血管,。分布于各種組織和細(xì)胞間的最微細(xì)的血管。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間,。平均直徑7～9微米,，數(shù)量極多,，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,，厚約0.5微米,。基膜外面有薄層結(jié)締組織,，其中有纖維細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。最細(xì)的毛細(xì)血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,，較粗的毛細(xì)血管由2～3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成,。分布于肌肉組織,、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的毛細(xì)血管,，內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續(xù)毛細(xì)血管,；分布于內(nèi)分泌腺,、腎臟等處的毛細(xì)血管，除有縫隙連接外,，細(xì)胞本身有許多小孔,，（孔徑800～1000埃），稱有孔毛細(xì)血管,；分布于肝,、脾、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細(xì)血管,，管腔擴(kuò)大,，稱血竇。毛細(xì)血管的管壁薄,、通透性大,、管徑細(xì)（8～10微米）、數(shù)量多,、血流速度慢，這些特點(diǎn)使其成為血液與組織液進(jìn)行物質(zhì)交換的場(chǎng)所,，又稱交換血管,。血竇（sinusoid）由毛細(xì)血管管腔擴(kuò)大而成，竇壁的一般結(jié)構(gòu)與毛細(xì)血管壁相同,，由單層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,，內(nèi)皮細(xì)胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結(jié)構(gòu)各有差別,。脾血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間有較寬裂隙,；肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞是不連續(xù)的，有較寬的細(xì)胞隙（0.1～0.5微米）；肝,、脾血竇的基膜不完整或無(wú)基膜,，通透性比毛細(xì)血管大，較大的蛋白質(zhì)和血細(xì)胞可以通過(guò),。肝血竇壁內(nèi)有枯否細(xì)胞,，脾血竇內(nèi)外有巨噬細(xì)胞，這兩種細(xì)胞都有吞噬能力,，可吞噬清除血液中的異物,、細(xì)菌等有害物質(zhì)，是機(jī)體單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成分,。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓微血管內(nèi)皮采用 - 膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等：
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠甲狀腺素(T4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠仙臺(tái)病毒抗體(HVJ-Ab)試劑盒 96T/48T
Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒
Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70試劑盒雞熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CDK3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒規(guī)格：96T/48T
苯二氮卓單小鼠單抗
磷酸化Disabled 1抗體
IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
瘦素(LEP)重組蛋白 Recombinant Leptin (LEP)
SCGB3A1重組人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD97 Protein Human 重組人 CD97 蛋白
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
瘦素(LEP)重組蛋白 Recombinant Leptin (LEP)
CD97 Protein Human 重組人 CD97 蛋白
IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
SCGB3A1重組人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠白細(xì)胞介素13(IL-13)試劑盒 ,，英文名： IL-13 ELISA Kit
Phaseolus vulgaris agglinin (PHA) ELISA Kit 菜豆凝集素(PHA)試劑盒
MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISAkit 小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanNeuroglobin,NGBELISAKit人腦紅蛋白
銅蛋白電泳染色試劑盒10次
sRANKL大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代,；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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