詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品名稱:大鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源:結(jié)腸
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS,、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
大鼠結(jié)腸成纖維體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠結(jié)腸成纖維分離自結(jié)腸組織,;結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,,在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸,、橫結(jié)腸,、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分,大部分固定于腹后壁,,結(jié)腸的排列酷似英文字母“M",,將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為:黏膜(上皮層,、固有層,、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結(jié)締組織),,肌層(內(nèi)環(huán)形,、外縱行兩層平滑肌),,外膜(纖維膜或漿膜),。結(jié)腸成纖維細(xì)胞主要分布于外膜(纖維膜或漿膜)結(jié)締組織內(nèi)。成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的結(jié)腸成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長(zhǎng),,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠結(jié)腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子促甲狀腺素試劑盒 兔子促甲狀腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子促甲狀腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子促甲狀腺素試劑盒、兔子促甲狀腺素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子促黃體激素試劑盒 兔子促黃體激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子促黃體激素試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子促黃體激素試劑盒,、兔子促黃體激素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔子雌二醇試劑盒 兔子雌二醇試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子雌二醇試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子雌二醇試劑盒、兔子雌二醇試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月,。
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒,,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒,、兔子基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat neuron specific enolase (NSE) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒
Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase,Casp4試劑盒人凋亡相關(guān)半胱肽酶4(Casp4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因棉花SGK321品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNAA630077B13geneELISAKit人類似RIKENcDNAA630077B13基因試劑盒規(guī)格:96T/48T
補(bǔ)體C3cα 鏈片段1抗體
磷酸化p53結(jié)合蛋白1抗體
IL23R重組大鼠 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli,,EPEC 1mgEPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli,,EPEC) 普通大腸埃希菌菌體蛋白(非致病性)
S100A16重組人 S100A16 / S100F 蛋白 Protein
GNB2L1 Protein Human 重組人 RACK1 / GNB2L1 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)
SDPR Protein Mouse 重組小鼠 SDPR 蛋白 (aa 2-180, His 標(biāo)簽)
EPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli,EPEC 1mgEPEC/E.coli(enteropathogenic E.coli,,EPEC) 普通大腸埃希菌菌體蛋白(非致病性)
GNB2L1 Protein Human 重組人 RACK1 / GNB2L1 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)
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S100A16重組人 S100A16 / S100F 蛋白 Protein
大鼠結(jié)腸成纖維細(xì)胞大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 ,,英文名: ALCAM ELISA Kit
Mouse beta naphthol (beta -naphthol) ELISA Kit 小鼠β萘酚(β-naphthol)試劑盒
ELISA 小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforirGH(HumanImmunoreactivegrowthhormone)ELISAKit人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素
通用型番茄斑萎病毒(TomatoSpottedWiltVirus;TSWV)試劑盒20次
ELISAKitNAP-2/CXCL7大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2