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大鼠精原細(xì)胞

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更新時間:2024-11-05 09:38:00瀏覽次數(shù):794

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X8238 主要用途 僅供科研研究實驗
大鼠精原細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:小鼠膀胱癌細(xì)胞+luc;MB49-PLV-LUC-PURO 兔乳腺上皮細(xì)胞 纈氨酰-tRNA合成酶抗體 人神經(jīng)膠質(zhì)母;U343 鋅指蛋白275抗體 TU212人喉癌細(xì)胞 FCN1蛋白抗體 IAR20 (大鼠肝細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

大鼠精原細(xì)胞

大鼠精原細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

睪丸

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形、橢圓形

YS-01X8238

細(xì)胞簡介:

大鼠精原分離自睪丸組織,;睪丸呈微扁的卵圓形,表面光滑,,覆蓋著鞘膜臟層;深部是質(zhì)地堅韌的白膜,,在睪丸后緣增厚并進(jìn)入睪丸,,形成睪丸縱膈,縱膈發(fā)出許多睪丸小隔深入睪丸實質(zhì),,將實質(zhì)分為睪丸小葉,,數(shù)量約為100200。每個小葉內(nèi)約有24條生精小管,,具有產(chǎn)生精子的作用,;生精小管之間的結(jié)締組織中有睪丸間質(zhì)細(xì)胞,具有產(chǎn)生雄激素的作用,。生精小管首先匯合成為精直小管(也稱直精小管),,精直小管進(jìn)入睪丸縱膈形成睪丸網(wǎng),之后睪丸網(wǎng)發(fā)出1215條輸出小管通過睪丸后上緣進(jìn)入附睪,。生精小管的生精上皮是精子產(chǎn)生的地方,,由生精細(xì)胞和支持細(xì)胞構(gòu)成,,成人的生精小管有3070cm長。精子的產(chǎn)生過程包括生精細(xì)胞的分化,、支持細(xì)胞的作用、雄激素的調(diào)節(jié)等,。生精細(xì)胞并不是一種細(xì)胞,它是多種細(xì)胞的統(tǒng)稱,,包括精原細(xì)胞,、初級精母細(xì)胞,、次級精母細(xì)胞,、精子細(xì)胞,、精子。前者依次發(fā)育分化為后者,,且依次從生精上皮的基部到管腔面排列,,最終形成精子進(jìn)入到管腔之中,并借助生精上皮外側(cè)的肌樣細(xì)胞的收縮作用向下一級管腔移動,。精原細(xì)胞是指由睪丸精子管上皮的原始生殖細(xì)胞經(jīng)過多次有絲分裂而形成的細(xì)胞,。原始的胚細(xì)胞經(jīng)分化形成精原細(xì)胞,精原細(xì)胞經(jīng)復(fù)制形成初級精母細(xì)胞,,初級精母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)第一次分裂后形成次級精母細(xì)胞,再經(jīng)過減數(shù)第二次分裂形成精細(xì)胞,。精細(xì)胞經(jīng)過變形最終形成精子,。精原細(xì)胞屬于雄性生殖細(xì)胞的早期發(fā)育階段,能不斷地進(jìn)行有絲分裂,,增加細(xì)胞數(shù)量,,并分化為精母細(xì)胞,。精原細(xì)胞貼近基膜,細(xì)胞呈圓形,,核大而圓,梁色深,。精原細(xì)胞在男性的一生中具有幾乎無限分裂的能力,,而且分裂過程中能夠保持原有的基因性狀不變。在增殖過程中,,通過精原細(xì)胞的分裂和分化,,由精原細(xì)胞產(chǎn)生精母細(xì)胞,,進(jìn)入成熟分裂,因而通過增殖可大大增加精母細(xì)胞的數(shù)量,。按理論推算,,一個精原細(xì)胞通過數(shù)次細(xì)胞分裂,可形成上百個初級精母細(xì)胞,。但在生精過程早期,,生精細(xì)胞很易發(fā)生變性,故實際上少于這個數(shù)字,。在精原細(xì)胞的增殖過程中,,有一部分Ad型精原細(xì)胞不再繼續(xù)分裂,而是保留下來,,成為新的精原干細(xì)胞,,因此通過增殖不僅能使精原干細(xì)胞不斷得到更新,且能使精原干細(xì)胞保持一定數(shù)量,,從而使精子的產(chǎn)生持續(xù)地進(jìn)行下去,,不會枯竭。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗,;

  4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

實驗室分離的大鼠精原采用混合酶多步消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠精原經(jīng)AP(堿性磷酸酶)免疫組化染色鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、GDNF,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):圓形、橢圓形

傳代特性:可傳2-3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO25%

大鼠精原體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

大鼠精原細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠精原細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)試劑盒   96T/48T

兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒   96T/48T

兔子表皮生長因子(EGF)試劑盒   96T/48T

兔子白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒   96T/48T

小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)試劑盒 96T/48T

Rat epinephrine (EPI) ELISA Kit 大鼠(EPI)試劑盒

Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 人骨堿性0酸酶(BALP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancatecholamine,CA試劑盒人兒茶酚胺(CA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系試劑盒20

humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人類似RIKENcDNA2610307008基因試劑盒規(guī)格:96T/48T

叉頭蛋白B1抗體

磷酸化β分泌酶抗體

MEP1A重組小鼠 MEP1A 蛋白 Protein

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

UBE2D4重組人 UBE2D4 蛋白 Protein

GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白

TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白

bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰島素蛋白

GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白

THSD1重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein

MBL1 Protein Rat 重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠精原細(xì)胞大鼠白三烯E4(LTE4)試劑盒 ,,英文名: LTE4 ELISA Kit

Mouse beta glucosidase (beta -glucosidase) ELISA Kit 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)試劑盒

ELISA 小鼠胃泌素(mouse Gasin)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIRF(HumanierferoegulatoryFactor)ELISAKit人干擾素調(diào)節(jié)因子

通用型番茄瘡痂病辣椒斑點病菌(Xahomonascampesispv.vesicatoria;Xcv)試劑盒20

NGAL大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白


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