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大鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-05 09:38:55瀏覽次數(shù):749

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X8239 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
大鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10 VMRC-LCD人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 TE-10 (人食管癌細(xì)胞) TBR1蛋白抗體 LLC-MK2 (恒河猴腎細(xì)胞) 環(huán)指蛋白47抗體 G蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體

詳細(xì)介紹

大鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞

大鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

口腔黏膜

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8239

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠口腔黏膜成纖維分離自口腔黏膜組織,;口腔(oral cavity)是消化道的起始部分,。前借口裂與外界相通,,后經(jīng)咽峽與咽相續(xù),??谇粌?nèi)有牙,、舌等器官,??谇坏那氨跒榇健?cè)壁為頰,、頂為腭,、口腔底為黏膜和肌等結(jié)構(gòu)??谇唤枭?、下牙弓分為前外側(cè)部的口腔前庭(oral vestibule)和后內(nèi)側(cè)部的固有口腔(oral cavity proper);當(dāng)上,、下頜牙咬合時(shí),,口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長(zhǎng),,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦,、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠口腔黏膜成纖維采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠口腔黏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%CO2,,5%

大鼠口腔黏膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

大鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔鉤端IgG(LepIgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔原片段F1+2(F1+2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat adrenomedullin (ADM) ELISA Kit 大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒

HumanCalretinin,CRELISAKit 人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCaveolin-1,Cav-1試劑盒人窖蛋白(Cav-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)T45品系試劑盒20

HumanSialicacid,SAELISAKit人唾液酸(SA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

14-3-3 sigma 重組鼠單克隆抗體

磷酸化叉頭蛋白家族抗體

INHBA重組小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 Protein

Agrin peptide 聚集蛋白抗原 0.5mgAgrin peptide 聚集蛋白抗原

PSG6重組人 PSG6 / PSG10 蛋白 Protein

GPA33 Protein Human 重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白

TNFRSF1A Protein Rat 重組大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Agrin peptide 聚集蛋白抗原 0.5mgAgrin peptide 聚集蛋白抗原

GPA33 Protein Human 重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白

INHBA重組小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 Protein

TNFRSF1A Protein Rat 重組大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

PSG6重組人 PSG6 / PSG10 蛋白 Protein

大鼠口腔黏膜成纖維細(xì)胞大鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒 ,,英文名: LTD4 ELISA Kit

Mouse beta 2 glycoprotein aibody IgA/G/M (1 beta 2-GP1 IgA/G/M) ELISA Kit 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)試劑盒

ELISA 小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIRAP(HumanICEprotease-activatingfactor)ELISAKitICE蛋白酶激活因子

通用型非變性裂解液適合各種細(xì)胞native蛋白

ELISAKitNE大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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