詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠顱蓋造骨細(xì)胞
組織來(lái)源:顱骨
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
大鼠顱蓋造骨體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠顱蓋造骨分離自顱骨組織,;造骨細(xì)胞(osteoblast)亦稱成骨細(xì)胞,。是參與骨組織形成的細(xì)胞。顱骨位于脊柱上方,,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),,起著保護(hù)和支持腦,、感覺(jué)器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,,內(nèi)有顱腔,,容納腦,,共8塊,。面顱為顱的前下部分,,包含眶、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu),構(gòu)成面部的支架,共15塊,。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,,負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化,。骨不斷地進(jìn)行著重建,,骨重建過(guò)程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域,,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),,形成骨吸收陷窩;其后,,成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,,分泌骨基質(zhì),骨基質(zhì)礦化而形成新骨,;破骨與成骨過(guò)程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),,也是藥物篩選,、生物材料開(kāi)發(fā)和生物工程研究的重要手段,。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來(lái)制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顱蓋造骨經(jīng)ALP染色檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代;若未超過(guò)80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素23(IL-23)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素2(IL-2)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)試劑盒 96T/48T
小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒
Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAKit 人原鈣黏素1(PCDH1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1試劑盒人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10次
Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit人垂草扁桃酸(VMA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框144抗體
磷酸化非受體酪激酶c-Abl抗體
CA8重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白 Protein
CD200受體1(CD200R1)重組蛋白 Recombinant CD200 Receptor 1 (CD200R1)
IP6K1重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白
FCAR Protein Rat 重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白
脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)
EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白
CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白
CD3D & CD3E重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein
大鼠顱蓋造骨細(xì)胞大鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 ,,英文名: LTB4 ELISA Kit
Mouse ierleukin 12 (IL-12/P40) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P40)試劑盒
ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon) 進(jìn)口分裝
CLIAKitfori-PTH(MouseiactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素
通用型非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitADP大鼠脂聯(lián)素