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本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠顱蓋造骨細胞
組織來源:顱骨
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形,、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
大鼠顱蓋造骨體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
大鼠顱蓋造骨分離自顱骨組織,;造骨細胞(osteoblast)亦稱成骨細胞,。是參與骨組織形成的細胞。顱骨位于脊柱上方,,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),,起著保護和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,,內(nèi)有顱腔,容納腦,,共8塊,。面顱為顱的前下部分,包含眶,、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu),構(gòu)成面部的支架,,共15塊,。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,,負責骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化,。骨不斷地進行著重建,,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),,分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),,形成骨吸收陷窩;其后,,成骨細胞移行至被吸收部位,,分泌骨基質(zhì),骨基質(zhì)礦化而形成新骨,;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學基礎(chǔ),,也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠顱蓋造骨經(jīng)ALP染色檢測,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理,?
1,、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素23(IL-23)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素2(IL-2)試劑盒 96T/48T
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1號染色體開放閱讀框144抗體
磷酸化非受體酪激酶c-Abl抗體
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脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)
EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白
CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白
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ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon) 進口分裝
CLIAKitfori-PTH(MouseiactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素
通用型非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKitADP大鼠脂聯(lián)素