詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
卵巢 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8244 |
細(xì)胞簡介:
大鼠卵泡顆粒(卵巢顆粒細(xì)胞)分離自卵巢組織,;卵巢是雌性動物的生殖器官,,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素,。卵巢的位置與睪丸相同,,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),,呈葡萄狀,,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),。大多數(shù)脊椎動物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),,而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能,。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,,其下方有薄層的結(jié)締組織,。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成,;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,,其中有許多血管,、淋巴管和神經(jīng)。卵巢顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞,,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動,、發(fā)育、排卵,、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細(xì)胞是卵泡內(nèi)的最大細(xì)胞群,,也是主要的功能細(xì)胞,,卵泡發(fā)育的顯著標(biāo)志之一就是顆粒細(xì)胞迅速生長及增殖,而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細(xì)胞凋亡引起,尤其在卵泡發(fā)育后期,,此外,,顆粒細(xì)胞還與卵泡膜細(xì)胞共同完成卵巢激素的合成,維持著有利于卵母細(xì)胞生長和成熟的微環(huán)境,。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形,。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡顆粒采用先機(jī)械分離,而后膠原酶消化,,最后差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡顆粒經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
大鼠卵泡顆粒體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素2受體(IL-2R)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素28(IL-28)試劑盒 96T/48T
小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)試劑盒 96T/48T
Human advanced oxidation protein products (AOPP) ELISA Kit 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)試劑盒
Humanbonesialoprotein,BSPELISAKit 人骨涎蛋白(BSP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCathepsinAibodies,CathAb試劑盒人組織蛋白酶抗體(CathAb)試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)MS8品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA2010109K09geneELISAKit人類似RIKENcDNA2010109K09基因試劑盒規(guī)格:96T/48T
26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型7抗體
磷酸化類固醇受體輔助活化因子-3
ERBB4重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
三葉因子2(TFF2)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 2 (TFF2)
EDNRB重組人 EDNRB / Endothelin B Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
三葉因子2(TFF2)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 2 (TFF2)
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白
ERBB4重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
EDNRB重組人 EDNRB / Endothelin B Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
大鼠卵泡顆粒細(xì)胞大鼠白介素8(IL-8)試劑盒 ,,英文名: IL-8 ELISA Kit
Mouse ierleukin 15 (IL-15) ELISA Kit 小鼠白介素15(IL-15)試劑盒
ELISA 小鼠生長因子(mouse GH) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIP-10/CXCL10(Mouseierferon-inducibleprotein10)ELISAKit小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10
通用型鳳仙花壞死斑病毒(ImpatiensNecroticSpotVirus;INSV)試劑盒20次
ELISAKitLp-PL-A2大鼠脂蛋脂酶A2
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行