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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
胚胎肝 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8248 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠胚肝間充質(zhì)干分離自胚胎肝組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,，并在身體里面起著去氧化,、儲(chǔ)存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官,。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞,。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,，并具有造血支持,、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用,。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,，存在于骨髓、脂肪組織,、臍血及多種胎兒組織,。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化,。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié),、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主?。?span>GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥,。胚胎肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞中含有MSC，且量較大,，可成為種子細(xì)胞,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚肝間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胚肝間充質(zhì)經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、EGF,、bFGF,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
大鼠胚肝間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素18(IL-18)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素17(IL-17)試劑盒 96T/48T
小鼠活化素A(Activin-A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neuron specific enolase (NSE) ELISA Kit 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒
humanBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 人β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Mi2-aibody試劑盒人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物培養(yǎng)細(xì)胞DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
HumanUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框97抗體
磷酸化突觸后密度蛋白93抗體
IL7R重組大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase 0.5mgFAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇激酶抗原
OMG重組人 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-420, His 標(biāo)簽) Protein
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (aa 730-1065, His & GST 標(biāo)簽)
EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase 0.5mgFAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇激酶抗原
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (aa 730-1065, His & GST 標(biāo)簽)
IL7R重組大鼠 IL7R / IL7RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白
OMG重組人 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-420, His 標(biāo)簽) Protein
大鼠胚肝間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠白介素6(IL-6)試劑盒 ,，英文名： IL-6 ELISA Kit
Mouse ierleukin 1 beta (IL-1 beta) ELISA Kit 小鼠白介素1β (IL-1β)試劑盒
ELISA 小鼠組胺(mouse HIS) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforINSELISAKit大鼠胰島素
通用型副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性試劑盒20次
ELISAKitApo-E大鼠載脂蛋白E
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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