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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)
組織來源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形,、梭形、多角形,，形態(tài)多樣
傳代特性：屬于高度分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
大鼠外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
大鼠外周血DC分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突,，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,，貼壁形態(tài)多樣,。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,，多數(shù)呈懸浮生長,， 細(xì)胞呈圓形，細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),，伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟,。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,，主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志,、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定,。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,，進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動,、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強的抗原攝取加工能力,，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化,、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,，不能激活T細(xì)胞的第二信號，可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受,。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86,、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,，一般在30%以下。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞,、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,、細(xì) 胞 形態(tài)等綜合鑒定,，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠促卵泡素 英文名稱： Folliopin 規(guī)格： 英文縮寫： FSH
凋亡相關(guān)因子 英文名稱： apoptosis-inducing factor Fas 規(guī)格： 英文縮寫： Fas
凋亡相關(guān)因子配體 英文名稱： apoptosis-inducing factor Fas Ligand 規(guī)格： 英文縮寫： Fas Ligand
小鼠酸性成纖維生長因子 英文名稱： acid fibroblast growth factor 規(guī)格： 英文縮寫： a-FGF
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒
Humanneuronalapoptosisinhibitoryprotein,NAIPELISAKit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-Endostatinaibody,ES-Ab試劑盒人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物堿性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法法定量試劑盒20次
Humanvionectin,VELISAKit人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)試劑盒規(guī)格：96T/48T
CD33抗體
內(nèi)臟脂肪組織源性絲蛋白酶抑制蛋白抗體
IFNA4重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
生長停滯DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白α(GADD45α)重組蛋白 Recombinant Growth Arrest And DNA Damage Inducible Protein Alpha (GADD45a)
RGS1重組人 RGS1 蛋白 Protein
ENG Protein Human 重組人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白
HA Protein H6N1 重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
生長停滯DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白α(GADD45α)重組蛋白 Recombinant Growth Arrest And DNA Damage Inducible Protein Alpha (GADD45a)
ENG Protein Human 重組人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白
IFNA4重組人 IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H6N1 重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
RGS1重組人 RGS1 蛋白 Protein
大鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)大鼠白介素27(IL-27)試劑盒 ,，英文名： IL-27 ELISA Kit
Mouse leukoiene B4 (LTB4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒
ELISA 小鼠IgE(mouse IgE) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-9(HumanIerleukin9)ELISAKIT人白介素9
通用型果膠化學(xué)比色法定量試劑盒20次
ELISAKitAChE大鼠乙酰酯酶
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