化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
小氣道 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8268 |
細胞簡介：
大鼠小氣道平滑肌分離自小氣道組織,；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道,。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點,。在平靜吸氣時,，空氣進入狹窄的鼻咽部，產(chǎn)生渦流,。由于小氣道已無軟骨支持,，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道,，易于受胸腔的壓力變化的影響,。小氣道上皮細胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用,。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,，這些細胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、產(chǎn)生化學(xué)因子進行宿主防御,、表達粘附分子,，并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡,。許多呼吸道疾病,，如哮喘、支氣管炎,、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,，都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞,；小氣道上皮細胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏,；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。小氣道的生理功能特點：①小氣道阻力??；②氣流速度慢；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例,。小氣管平滑肌細胞主要功能：①保持氣道張力維持小氣道形態(tài),；②肺小氣道進行氣體交換,，病變可引起換氣功能障礙,；③炎癥、痰液阻塞或當氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時容易造成小氣道閉合,、萎陷,。小氣管平滑肌細胞與主要病生理變化：①支氣管炎；②肺氣腫,；③慢性阻塞性肺疾病,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長,；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS、EGF,、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
大鼠小氣道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠促黃體生成激素(mouse LH) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠(mouse Lysozyme) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠巨嗜細胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠MCP-3(mouse MCP-3) 作用： ELISA 規(guī)格： 進口分裝
小鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human bactericidal / permeability increasing protein (BPI) ELISA Kit 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)試劑盒
Humanpokeweedmitogen,PWMELISAKit 人美洲商陸素(PWM)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgGaibody,EHFIgG試劑盒人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物結(jié)構(gòu)域重排甲基轉(zhuǎn)移酶(DomaiearrangedMethylase;DRM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
HumanVitaminK1,，VK1ELISAKit人K1(VK1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
ChAT乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體
尿素轉(zhuǎn)運型糖蛋白A2抗體
PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CD68 CD68抗原 0.5mgCD68 CD68抗原
PTPRA重組人 PTPRA / PTPalpha 蛋白 (aa 174-793, His & GST 標簽) Protein
ENO1 Protein Human 重組人 ENO1 / Enolase 1 / alpha-enolase 蛋白
AHSG Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-A / AHSG 蛋白
CD68 CD68抗原 0.5mgCD68 CD68抗原
ENO1 Protein Human 重組人 ENO1 / Enolase 1 / alpha-enolase 蛋白
PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
AHSG Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-A / AHSG 蛋白
PTPRA重組人 PTPRA / PTPalpha 蛋白 (aa 174-793, His & GST 標簽) Protein
大鼠小氣道平滑肌細胞大鼠白介素23(IL-23)試劑盒 ,，英文名： IL-23 ELISA Kit
Mouse leukocyte differeiation aigen 30 (CD30) ELISA Kit 小鼠白細胞分化抗原30(CD30)試劑盒
ELISA 小鼠IgM(mouse IgM) 進口分裝
CLIAKitforIL-8/CXCL8(Mouseierleukin8)ELISAKit小鼠白介素8
通用型海鳥彎曲桿菌(Campylobacterlaridis)試劑盒20次
ELISAKitAch大鼠乙酰
化工儀器網(wǎng)