詳細介紹
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產(chǎn)品名稱:大鼠眼動脈平滑肌細胞
組織來源:眼動脈
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含FBS、EGF,、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,5%
大鼠眼動脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞簡介:
眼動脈是眼眶及內(nèi)容物最主要的血液供應(yīng),是頸內(nèi)動脈主要分枝,,也是交通顱內(nèi)外血管的重要通道。有研究結(jié)果認為,,絕大多數(shù)眼動脈起源于ICA剛出海綿竇處,且多數(shù)起源于ICA床突上段內(nèi)上壁,,少數(shù)起源于上壁,少數(shù)眼動脈可起源于ICA海綿竇段及腦膜中動脈,。眼動脈的走行分為顱內(nèi)段,、管內(nèi)段及眶內(nèi)段,,眼動脈在管內(nèi)段一般行走于視神經(jīng)上方,顱內(nèi)段和眶內(nèi)段再分為五段:1,、短臂;2,、A角,;3、長臂,;4、B角,;5,、遠側(cè)部,。眼動脈進入眶內(nèi)后沿視神經(jīng)向下外側(cè)走行,終止于眶孔的上內(nèi)側(cè)角,。眼動脈的分枝一般分為眼組、眶組及眶外組,。眼組分為視網(wǎng)膜中央動脈睫前動脈及眼球的脈絡(luò)叢,;眶組分為淚腺動脈和肌動脈,;眶外組分為篩后動脈、篩前動脈,、眶上動脈、瞼內(nèi)側(cè)動脈,、鼻背動脈(終末枝),。眼動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。眼動脈供應(yīng)整個眼球,、眼球附屬器及部分附近組織的營養(yǎng),。眼動脈可發(fā)生痙攣、血栓,、栓塞及出血等,均可嚴重影響視力,。頸內(nèi)動脈眼動脈瘤簡稱眼動脈瘤,又稱床突旁動脈瘤或頸內(nèi)動脈腹側(cè)動脈瘤,。眼動脈瘤是位于眼動脈和后交通動脈之間的動脈瘤,,占全部顱內(nèi)動脈瘤的0.47%~9.26%,,30%~70%患者表現(xiàn)為SAH,1/3有視功能損傷,,如視力減退,、視野缺損和視神經(jīng)等,。體外培養(yǎng)的眼動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠眼動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的大鼠眼動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細胞如何處理,?
1、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
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小鼠雌三醇試劑盒 小鼠雌三醇試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠雌三醇試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠雌三醇試劑盒,、小鼠雌三醇eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠雌激素試劑盒 小鼠雌激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠雌激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠雌激素試劑盒,、小鼠雌激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠雌二醇受體試劑盒 小鼠雌二醇受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠雌二醇受體試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠雌二醇受體試劑盒、小鼠雌二醇受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
小鼠堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble Toll like receptor 2 (sTLR2) ELISA Kit 大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)試劑盒
Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-epidemichemorrhagicfevervirusIgMaibody,EHFIgM試劑盒人抗流行性出血熱病毒抗體IgM(EHF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物結(jié)合吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量試劑盒(包括萃取)20次
HumanVitaminE,,VEEELISAKit人(VE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DKK2抗體
脯-絲-蘇磷酸酶相互作用蛋白2抗體
GFRA1重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
Defensin Beta1 防御素β1抗原 0.5mgDefensin Beta1 防御素β1抗原
GSTM2重組人 GSTM2 / GST4 蛋白 Protein
ENO2 Protein Human 重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白
CD1D Protein Mouse 重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白
Defensin Beta1 防御素β1抗原 0.5mgDefensin Beta1 防御素β1抗原
ENO2 Protein Human 重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白
GFRA1重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD1D Protein Mouse 重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白
GSTM2重組人 GSTM2 / GST4 蛋白 Protein
大鼠眼動脈平滑肌細胞大鼠白介素21(IL-21)試劑盒 ,,英文名: IL-21 ELISA Kit
Mouse leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-1RA(mouse IL-1ra) 進口分裝
CLIAKitforIL-7(RatIerleukin-7)ELISAkit大鼠白介素7
通用型灰斑病灰梨孢菌(GreyLeafSpotPyriculariagrisea)試劑盒20次
ELISAKitGlp-1大鼠胰高血糖素樣肽1