詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:大鼠子宮內(nèi)膜干細(xì)胞
組織來源:子宮
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
大鼠子宮內(nèi)膜干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介:
大鼠子宮內(nèi)膜干細(xì)胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,,位于盆腔中部,,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),,可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,,由上皮(屬單層柱狀上皮,,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,,約占內(nèi)膜厚度的4/5,;基底層較薄較致密,約占1/5,,功能層可剝脫,,而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的最內(nèi)層,位于子宮腔面,,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位,。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,,MSCs)來源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,,具有向脂肪細(xì)胞,、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,,運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,,目前已能夠從骨髓、脂肪,、滑膜,、骨骼、肌肉等組織以及羊水,、臍帶,、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮內(nèi)膜干采用膠原酶消化法,、低密度稀釋克隆制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮內(nèi)膜經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠促胰液素 英文名稱: Mouse Secretin 規(guī)格: 英文縮寫: SCT
小鼠分泌型IgA 英文名稱: Mouse secretory Immunoglobulin A 規(guī)格: 英文縮寫: sIgA
小鼠抗小核糖核蛋白/SM抗體 英文名稱: Mouse Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide/Sm 規(guī)格: 英文縮寫: sNP/SM
小鼠超氧化物歧化酶 英文名稱: Mouse Superoxide Dismase 規(guī)格: 英文縮寫: SOD
小鼠降鈣素受體(C)ELISA 試劑盒 96T/48T
Three iodothyronine (T3) ELISA Kit 人三甲狀腺原(T3)試劑盒
HumanmembraneIgM,mIgMELISAKit 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseB試劑盒人抗DNA酶B抗體(ai-DNaseB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物基因組DNA化試劑盒(高多糖/酚)50次
Humanαmannosidase,,αManaseELISAKit人β甘露糖苷酶(βManase)試劑盒規(guī)格:96T/48T
ECM29蛋白抗體
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員13A抗體
ENPP2重組食蟹猴 Autotaxin / ENPP2 蛋白 Protein
HSP-60( Heat shock protein-60 0.5mgHSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60(抗原)
PLTP重組人 PLTP 蛋白 Protein
EIF5 Protein Human 重組人 EIF-5A / EIF5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IFNGR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNGR1 / CD119 蛋白
HSP-60( Heat shock protein-60 0.5mgHSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60(抗原)
EIF5 Protein Human 重組人 EIF-5A / EIF5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
ENPP2重組食蟹猴 Autotaxin / ENPP2 蛋白 Protein
IFNGR1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNGR1 / CD119 蛋白
PLTP重組人 PLTP 蛋白 Protein
大鼠子宮內(nèi)膜干細(xì)胞大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)試劑盒 ,,英文名: IL1RL1 ELISA Kit
Mouse L-phenylalanine (LPA) ELISA Kit 小鼠苯(LPA)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-4(mouse IL-4) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-6(RabbitIerleukin6)ELISAKit兔白介素6
通用型雞病毒性關(guān)節(jié)呼腸孤病毒(Reovirus;REO)試劑盒20次
ELISAKitPI大鼠胰島素原
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作