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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
鼻黏膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8318 |
細(xì)胞簡介：
兔鼻黏膜成纖維分離自鼻黏膜組織,；黏膜是覆蓋在機體內(nèi)消化,、呼吸,、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成,。根據(jù)部位不同，有口腔黏膜,、胃腸黏膜,、鼻腔黏膜、氣管黏膜,、陰道黏膜,、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能,、部位不一而不盡相同,。鼻腔黏膜，簡稱鼻黏膜,，覆蓋于鼻腔表面,，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌,。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團,；細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦,、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長,；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
實驗室分離的兔鼻黏膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔鼻黏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔鼻黏膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬抗受體(A)ELISAKit ELISA.
中文名稱 方法 規(guī)格
豬組胺(HIS)ELISAKit ELISA.
豬雌二醇(E2)ELISAKit ELISA.
豬0酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒
Human basic fibroblast growth factor 4 (bFGF-4) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒
PorcineTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAmAC-1ELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1
血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量試劑盒20次
Porcineacetylcholine,ACHELISAKit豬乙酰(ACh)試劑盒
PE標(biāo)記人CD83單克隆抗體
微管蛋白抗體
HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
PADI4 (HL-60 PAD 0.5mgPADI4 (HL-60 PAD)(Protein-arginine deiminase type IV，PADI 4,，PAD I4 ) 關(guān)節(jié)相關(guān)基因
CDH5重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標(biāo)簽)
ACVR2A Protein Human 重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白
PADI4 (HL-60 PAD 0.5mgPADI4 (HL-60 PAD)(Protein-arginine deiminase type IV,，PADI 4，PAD I4 ) 關(guān)節(jié)相關(guān)基因
APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ACVR2A Protein Human 重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白
CDH5重組人 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
兔鼻黏膜成纖維細(xì)胞大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒 ,，英文名： β-TG ELISA Kit
Rabbit soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒
ELISA 小鼠核轉(zhuǎn)錄因子(mouse NF-kB ) 進口分裝
CLIAKitforIL-16ELISAKIT大鼠白介素16
通用型馬傳染性貧血(EquineInfectiousAnemia;EIA)試劑盒20次
ELISAKitANG-R-Tie2大鼠血管生成素受體Tie2
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