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兔鼻黏膜上皮細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X8319 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
兔鼻黏膜上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:多藥耐藥相關(guān)蛋白9抗體 細(xì)胞分化蛋白SEPT6抗體 NCI-H2073人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NOTO蛋白抗體 Hs 695T人黑素瘤細(xì)胞 原鈣粘蛋白γA5抗體 SCC-4人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔鼻黏膜上皮細(xì)胞

兔鼻黏膜上皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

鼻黏膜

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X8319

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔鼻黏膜上皮分離自鼻黏膜組織,;黏膜是覆蓋在機(jī)體內(nèi)消化,、呼吸、泌尿,、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),,由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,,有口腔黏膜,、胃腸黏膜、鼻腔黏膜,、氣管黏膜,、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱(chēng),。它們的結(jié)構(gòu)也因功能,、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,,簡(jiǎn)稱(chēng)鼻黏膜,,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨,、骨或骨骼肌,。根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同,鼻黏膜又分為前庭部,、呼吸部和嗅部三部分,。前庭部是鄰近外鼻孔的部分,有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入,。呼吸部占鼻黏膜的大部,,有發(fā)達(dá)的上皮纖毛,它們可向咽部擺動(dòng),,黏著有塵粒,、細(xì)菌的黏液排向咽部,終將它們排出體外。此外,,此部分有豐富的血管與腺體,,對(duì)吸入的空氣有加溫和濕潤(rùn)作用。嗅部黏膜范圍較小,,主要位于鼻腔頂部,。它含有一種專(zhuān)司嗅覺(jué)的嗅細(xì)胞及嗅腺,它們分泌能溶解到達(dá)嗅區(qū)的含氣味的微粒,,刺激嗅細(xì)胞表面上的嗅毛產(chǎn)生嗅覺(jué),,而且還由于嗅細(xì)胞具有不同的受體,可分別接受不同化學(xué)分子的刺激,,因此可產(chǎn)生不同的嗅覺(jué),。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔鼻黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的兔鼻黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBSEGF,、Hydrocortisone,、腎上腺素、甲狀腺素,、Insulin,、TransferrinSelenium Solution,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

兔鼻黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)僀

兔鼻黏膜上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

兔鼻黏膜上皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

無(wú)形體核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T

東方體核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T

人皰疹病毒6(HHV-6)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T

(OC43/HKU1)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>)   48T

小鼠第八因子相關(guān)抗原(FAg)ELISA 試劑盒

Human fetal hemoglobin (HBF) ELISA Kit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒

HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISAKit 人單皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanarylhydrocarboeceptor,AhR試劑盒人芳香烴受體(AhR)試劑盒

植物源性食品芥末(mustard)試劑盒20

Humahymosinα1ELISAKit人肽α1(Thymosinα1)試劑盒

PE標(biāo)記小鼠CD62L單克隆抗體

微絲相關(guān)蛋白3樣抗體

GREM1重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

蛋白酶激活受體4(PAR4)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)

CFL1重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標(biāo)簽)

A Beta1-40 (mutation type, MT 0.1mgA Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40

FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD83重組小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白

ABHD14B重組人 ABHD14B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

兔鼻黏膜上皮細(xì)胞大鼠β細(xì)胞素(BTC)試劑盒 ,英文名: BTC ELISA Kit

Mouse esadiol receptor (ER) ELISA Kit 小鼠雌二醇受體(ER)試劑盒

ELISA 小鼠核轉(zhuǎn)錄因子p65(mouse NF-kBp65)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-15ELISAKIT大鼠白介素15

通用型馬萊姆癥嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體(LymeandAnaplasmaPhagocytophilum)試劑盒20

ELISAKitANG-R-Tie1大鼠血管生成素受體Tie1

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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