詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
腸 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X8329 |
細(xì)胞簡介:
兔腸黏膜上皮分離自腸道組織,;腸道指的是從胃幽門至門的消化管,。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,,形成糞便,,再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng),。腸黏膜上皮細(xì)胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的道防線,。因此,,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外,,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用,。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生,、性質(zhì)和強度。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
實驗室分離的兔腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔腸黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài):
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠膀胱抗原(BTA)試劑盒 96T/48T
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)試劑盒 96T/48T
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒 96T/48T
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 96T/48T
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human endotoxin (ET) ELISA Kit 人內(nèi)毒素(ET)試劑盒
HumanαLactalbumin,α-LaELISAKit 人α乳清蛋白(α-La)試劑盒 96T/48T 進口分裝
GoatTumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒山羊壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母0脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量試劑盒20次
MouseClusterofdiffereiation19,CD19ELISAKit小鼠CD19分子(CD19)試劑盒規(guī)格:96T/48T
SH2B蛋白抗體
細(xì)胞死亡防衛(wèi)蛋白1抗體
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif 0.5mgcx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原
LGALS3重組人 Galectin-3 / LGALS3 蛋白 Protein
COLGALT2 Protein Human 重組人 GLT25D2 蛋白
VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白
cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif 0.5mgcx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原
COLGALT2 Protein Human 重組人 GLT25D2 蛋白
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
VSIG4 Protein Mouse 重組小鼠 VSIG4 蛋白
LGALS3重組人 Galectin-3 / LGALS3 蛋白 Protein
兔腸黏膜上皮細(xì)胞大鼠β防御素(β-Defensin)試劑盒 ,英文名: β-Defensin ELISA Kit
Mouse thyroopin releasing hormone (H) ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒
ELISA 小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥苷酸(mouse 8-OHdG) 進口分裝
CLIAKitforIL-10(RabbitIerleukin10)ELISAKit兔白介素10
通用型密執(zhí)歲棍狀桿菌(Clavibactermichiganensissubsp.michiganenesis;Cmm)試劑盒20次
ELISAKitVEGF-B大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B