詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱(chēng):兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源:腸
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔腸微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔腸微血管內(nèi)皮分離自腸道組織,;腸道指的是從胃幽門(mén)至門(mén)的消化管,。腸是消化管中長(zhǎng)的一段,也是功能重要的一段,。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過(guò)直腸經(jīng)門(mén)排出體外,。腸道堪稱(chēng)身體勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng),。微血管是極細(xì)微的血管,管徑平均為6-9μm,,連于動(dòng),、靜脈之間,互相連接成網(wǎng)狀,。微血管壁薄,,管徑較小,血流很慢,,通透性大,。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,,在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織,。另外還常可見(jiàn)到一種扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面,,稱(chēng)為周細(xì)胞,。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸微血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISAKit ELISA. 96T/48T
綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit ELISA. 96T/48T
綿羊白介素2(IL-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)試劑盒
Humanproteolipidprotein,PLPELISAKit 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,Bid試劑盒人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20次
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Tau微管蛋白激酶2抗體
先天性裂手/裂足畸形相關(guān)蛋白DSS1抗體
GRN重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 Protein
CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease 0.5mgCAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶(抗原)
NELL2重組人 NELL2 蛋白 Protein
FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白
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NELL2重組人 NELL2 蛋白 Protein
兔腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒 ,,英文名: Aβ1-40 ELISA Kit
Mouse coicoopin releasing hormone (CRH) ELISA Kit 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒
ELISA 小鼠抑瘤素mouse Oncostatin M(mouse OSM) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-1ELISAKit大鼠白介素1
通用型南瓜黃化花葉病毒(ZucchiniYellowMosaicVirus;ZYMV)試劑盒20次
ELISAKitaGT大鼠血管緊張素原