詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔腓腸肌細胞
組織來源:骨骼肌
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔腓腸肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞簡介:
兔腓腸肌分離自小腿肌肉組織;腓腸肌位于小腿后面的皮下,,是一個淺表的肌肉,,當人體站立時,可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌,。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉,,有內(nèi)、外二頭,,內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起,,外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端,,在二頭的深面各有一滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大,,在腘窩下角彼此鄰近,,所成夾角多為25°-30°,此肌下行與比目魚肌移行為跟腱,,止于跟骨結(jié)節(jié),。腓腸肌的動脈發(fā)自腘動脈、靜脈與動脈伴行,,注入腘靜脈或小隱靜脈,。腓腸肌的神經(jīng)全部來自脛神經(jīng)。包括內(nèi),、外側(cè)肌神經(jīng),。腓腸肌在行走及站立時能提足跟向上,直立時,,腓腸肌和比目魚肌都參加強固膝關(guān)節(jié),,并調(diào)節(jié)小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕,,可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn),。腓腸肌還可影響足的縱弓,該肌癱瘓或時,,足縱弓將加深,。該肌由脛神經(jīng)支配,股骨髁上骨折時,,因腓腸肌收縮遠側(cè)端常自后移位,。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉,。腓腸肌細胞屬于骨骼肌細胞的一種,,骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,,約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌,,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管,、淋巴分布,,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小,、位置、起止點,、纖維方向和作用等命名,。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌,、三角肌,、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,,不分支,,有明顯橫紋,核很多,,且都位于細胞膜下方,。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶),。明帶染色較淺,,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線,。H線的中部有一M線,。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線,。兩個Z線之間的區(qū)段,,叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。
方法簡介:
實驗室分離的兔腓腸肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔腓腸肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細胞如何處理?
1,、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
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ELISA 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4) 分裝
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