化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：兔肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源：肺小動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS,、EGF,、bFGF、IGF,、VEGF,、Heparin、Hydrocortisone,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔肺小動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介：
兔肺小動(dòng)脈內(nèi)皮分離自肺小動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈干是短而粗的動(dòng)脈,，自右心室的動(dòng)脈圓錐起始,，向左后上方斜升,，先在升主動(dòng)脈根部的前面,，繼而至其左側(cè)，至主動(dòng)脈弓的下方,，約在第5胸椎高度,，分為左、右肺動(dòng)脈,。左肺動(dòng)脈較短,，橫行向左，經(jīng)左主支氣管前方至左肺門,，分兩支進(jìn)入左肺的上,、下葉。右肺動(dòng)脈較長,，橫行向右,，經(jīng)主動(dòng)脈升部和上腔靜脈的后方達(dá)右肺門，分3支進(jìn)入右肺上,、中,、下葉。左、右肺動(dòng)脈的各分支在肺實(shí)質(zhì)內(nèi)又反復(fù)分支,，與支氣管的分支伴行,，后達(dá)肺泡壁，形成稠密的毛細(xì)血管網(wǎng),。肺動(dòng)脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血,。在肺動(dòng)脈干分叉處稍左側(cè)與主動(dòng)脈弓下緣之間有一結(jié)締組織索，稱動(dòng)脈韌帶,。管徑在0.3-1mm之間,，為小動(dòng)脈（small-artery），小動(dòng)脈包括粗細(xì)不等的幾級分支,，也屬肌性動(dòng)脈,。較大的小動(dòng)脈，內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,，中膜有幾層平滑肌,，外膜厚度與中膜相近，一般沒有外彈性膜,?？趶皆?span>1mm以下的動(dòng)脈，管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質(zhì)纖維,。小動(dòng)脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,，也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動(dòng)脈,，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2,。中膜的肌層相對比其他動(dòng)脈為厚，當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時(shí),，其管腔可以閉塞,，而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi)，從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力,。如果有許多小動(dòng)脈同時(shí)收縮,，可使血壓顯著上升。反之,，當(dāng)小動(dòng)脈的平滑肌舒張時(shí),，則可使大量的血液流入毛細(xì)血管，外周阻力明顯下降,，血壓降低,。終末小動(dòng)脈(terminal arteri-ole)的口徑為20-30μm；后小動(dòng)脈(metar-teriole),，又稱毛細(xì)血管前小動(dòng)脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12-15μm,。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌，在毛細(xì)血管前小動(dòng)脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚,，叫做毛細(xì)血管前括約肌(precapillary sphinc-ter),，其收縮或舒張，可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,，是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)",。支配小動(dòng)脈平滑肌的交感神經(jīng)纖維，可延伸到終末小動(dòng)脈和后小動(dòng)脈的平滑肌細(xì)胞,。在毛細(xì)血管前括約肌上交感神經(jīng)纖維特別豐富,。肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡,、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì),、維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺小動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺小動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管緊張素 I (mouse ANG I) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 Phoenix
小鼠血管緊張素 II (mouse ANG II) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 Phoenix
mouse CD 40L ELISA Kit 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 奧地利 Bender
大鼠 C 反應(yīng)蛋白 (rat CRP) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 美國 ADI
新型抑癌基因抗體
NF-kappa-B抑制子beta抗體
CCL2重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein
1α(MEP1α)重組蛋白 Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)
RIOK1重組人 RIOK1 / RIO kinase 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CDC37 Protein Human 重組人 CDC37 / CDC37A 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IgG Protein Rabbit 重組兔 IgG-Fc 蛋白 (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser)
1α(MEP1α)重組蛋白 Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)
CDC37 Protein Human 重組人 CDC37 / CDC37A 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
CCL2重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein
IgG Protein Rabbit 重組兔 IgG-Fc 蛋白 (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser)
RIOK1重組人 RIOK1 / RIO kinase 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠仙臺病毒(Sendai)pcr檢測試劑盒
Rat bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒
Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit 人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)pcr檢測試劑盒分裝
Chickenheparansulfate,HS試劑盒雞類肝素(HS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CDK4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISAKit小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔肺小動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞豬組織因子(TF)ELISA 試劑盒
Peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒
Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforApo-H(HumanApolipoproteinH)ELISAKit人載脂蛋白H
溴脫氧尿核苷(BrdU)溶液(100毫摩爾)1毫升
Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit豬髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
化工儀器網(wǎng)