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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肝臟 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、巨噬細(xì)胞 | YS-01X8351 |
細(xì)胞簡介：
兔枯否分離自肝臟組織,；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下,，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺,，為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹,，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,，僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接,?？莘袷霞?xì)胞(Kupffer細(xì)胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細(xì)胞，它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒,，并能吞噬和清除肝血竇中的細(xì)菌,、異物和衰老的紅細(xì)胞，并把血紅蛋白分解成,。此外,，肝巨噬細(xì)胞也有處理抗原，誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,，參與免疫調(diào)節(jié)的作用,。枯否氏細(xì)胞和一般巨噬細(xì)胞不同,，枯否氏細(xì)胞不具有增加抗原免疫原性的能力,，相反有消除或減弱抗原性的作用?？莘袷霞?xì)胞能吞噬來自血液循環(huán)的抗原抗體復(fù)合物和其他有害物質(zhì),，以消除這些物質(zhì)對機體的損害?？莘窦?xì)胞功能障礙可導(dǎo)致腸源性內(nèi)毒素血癥,。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。
方法簡介：
實驗室分離的兔肝枯否采用混合酶灌流消化,、低速離心,、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔肝枯否經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形,、巨噬細(xì)胞
傳代特性：屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：（12mM）
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔肝枯否體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISAKit ELISA
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit ELISA
小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit ELISA
AF750標(biāo)記的多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白DAT抗體
白細(xì)胞抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體
NCSTN重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein
蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)
VAMP3重組人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein
CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白
IL10RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽
CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白
FGF21重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein
FGFR4 Protein Rat 重組大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
CANT1重組人 CANT1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit 大鼠A(CsA)試劑盒
Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)pcr檢測試劑盒分裝
Chickenα-Glucosidase,a-Glu試劑盒雞α葡萄糖苷酶(a-Glu)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞αSMA蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit小鼠(EPI)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔肝枯否細(xì)胞大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)試劑盒 ,，英文名： PKCζ ELISA Kit
N cadherin / neural cadherin (N-Cad) ELISA Kit 人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)試劑盒
RatIerleukin17,IL-17ELISAKIT 大鼠白介素17(IL-17)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforCXCR3(HumanCXC-chemokinereceptor3)ELISAKit人CXC趨化因子受體3
細(xì)胞色素P450亞酶CYP2E1(NPH)活性比色法定量試劑盒20次
RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISAKit大鼠脂酰合成酶(ACS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長,；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進行
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