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兔骨髓單個核細(xì)胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
貨號 YS-01X8355 主要用途 僅供科研研究實驗
兔骨髓單個核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:鋅指蛋白689抗體 核糖核酸結(jié)合蛋白2抗體 K-562 [K562] (人慢性髓原白血病細(xì)胞) 大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 JIMT-1人乳腺癌細(xì)胞 大鼠脂肪干細(xì)胞 HB611 (人肝癌細(xì)胞) 小鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔骨髓單個核細(xì)胞

兔骨髓單個核細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

骨髓

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

圓形

YS-01X8355

細(xì)胞簡介:

兔骨髓單個核分離自骨髓,;骨髓是機體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細(xì)菌,、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此,,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓。出生時,,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細(xì)胞是骨髓中具有單個核的細(xì)胞,,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞,。注意這里是(mononuclear cell)單個核細(xì)胞,而不是(Monocyte)單核細(xì)胞,。單個核細(xì)胞的體積,、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同,利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,,可將各種血細(xì)胞與單個核細(xì)胞分離。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;

  2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;

  4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進行。

方法簡介:

實驗室分離的兔骨髓單個核采用取骨髓,、通過密度梯度離心法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔骨髓單個核經(jīng)過檢測,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài):圓形

傳代特性:不增殖,;不傳代

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

兔骨髓單個核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

兔骨髓單個核細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

兔骨髓單個核細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠受體()ELISAKit   ELISA

小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)ELISAKit   ELISA

小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISAKit   ELISA

小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit   ELISA

EB病毒核抗原-3A抗體

谷受體亞基δ2/GluR-δ2抗體

PLAT重組小鼠 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

蛋白Z(PROZ)重組蛋白 Recombinant Protein Z (PROZ)

EPDR1重組人 EPDR1 蛋白 Protein

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白

IL6 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白

ABCA1(ATP binding cassette transporter A1 0.5mgABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗原

COQ7 Protein Human 重組人 COQ7 蛋白

CCL6重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 Protein

GDNF Protein Rat 重組大鼠 GDNF 蛋白

PDGFRA重組人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA pcr檢測試劑盒

Human visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒

Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)pcr檢測試劑盒分裝

GuineapigGrowthhormone,GH試劑盒豚鼠生長激素(GH)試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20

Mousec-fosELISAKit小鼠c-fos試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔骨髓單個核細(xì)胞大鼠皮敵菌素(DCD)試劑盒 ,英文名: DCD ELISA Kit

Mouse thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 小鼠血栓前體蛋白(TpP)試劑盒

Rat5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 大鼠5羥色胺(5-HT)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGp49a(Humanglycoprotein49A)ELISAKit人糖蛋白49A

細(xì)胞丁酰酯酶活性比色法定量試劑盒20

Ratthyroopin-releasinghormone,HELISAKit大鼠促甲狀腺素釋放激素(H)試劑盒規(guī)格:96T/48T


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