詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔關(guān)節(jié)囊成纖維細胞
組織來源:關(guān)節(jié)囊
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔關(guān)節(jié)囊成纖維體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞簡介:
兔關(guān)節(jié)囊成纖維分離自關(guān)節(jié)囊組織,;關(guān)節(jié)囊(articular capsule)是由結(jié)締組織構(gòu)成的膜囊,附著于關(guān)節(jié)的周圍,,密封關(guān)節(jié)腔,。關(guān)節(jié)囊的壁共有兩層:外層為纖維層;內(nèi)層為滑膜層,。纖維層實際上是一個連結(jié)骨的骨膜向另一骨骨膜的移行,。纖維層厚而堅韌,由致密結(jié)締組織構(gòu)成,,含有豐富的血管和神經(jīng),。其淺層纖維多呈縱行排列;深層纖維主要為環(huán)行纖維,。纖維層的厚薄,,各個關(guān)節(jié)不相同,,即是在同一關(guān)節(jié)中,各部也不一致一般在運動范圍小的或是負重較大的關(guān)節(jié)中,,都較厚而緊張,,相反,于運動靈活的關(guān)節(jié),,則較薄而松弛,。有的關(guān)節(jié)囊的部分纖維囊缺如,僅一層滑膜層,;有的部分明顯增厚,,形成韌帶?;颖《釢?,是由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,襯在纖維層內(nèi)面,,周緣附著在關(guān)節(jié)軟骨的邊緣,。它朝向關(guān)節(jié)腔的內(nèi)面光而發(fā)亮,此面上蓋有一層內(nèi)皮細胞,?;は蜿P(guān)節(jié)腔分泌滑液,滑液是稍粘稠而透明的液體,,可減少關(guān)節(jié)中相連骨的摩擦,是一種滑潤劑,?;け砻婵尚纬山q毛或皺襞突入關(guān)節(jié)腔內(nèi)。有時滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出,,形成滑膜囊,,常位于肌腱與骨面之間。有時滑膜層突出不明顯,,僅呈深窩狀,,稱為囊狀隱窩,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,;成纖維細胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡介:
實驗室分離的兔關(guān)節(jié)囊成纖維采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔關(guān)節(jié)囊成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細胞如何處理,?
1、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
蝦胺/酚乙醇胺 英文名稱: Octopamine 英文縮寫: OPM
河蟹5羥色胺 英文名稱: 5-Hydroxyyptamine 英文縮寫: 5-HT
鱸魚 英文名稱: Coisol 英文縮寫: CO
鱸魚/胞壁質(zhì)酶 英文名稱: Lysozyme /Muramidase 英文縮寫: Lysozyme
PAP1結(jié)合蛋白抗體
環(huán)指蛋白113B抗體
ART4重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 Protein
促胰液素(SCT)重組蛋白 Recombinant Secretin (SCT)
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標簽)
IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白
Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta 0.5mgActin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動蛋白(抗原)
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標簽)
ENPP2重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標簽) Protein
ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標簽)
ANTXR1重組人 ANTXR1 蛋白 Protein
小鼠多瘤病毒(POLY)試劑盒
Rayon, hemagglinin (FHA) ELISA Kit 人絲狀血球凝集素(FHA)試劑盒
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒分裝
HumanAquaporin1,AQP-1試劑盒人水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
植物乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性比色法定量試劑盒20次
Humaissuefactor,,IFELISAKit人組織因子(TF)試劑盒
兔關(guān)節(jié)囊成纖維細胞大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 ,,英文名: iFABP ELISA Kit
Mouse FMS like tyrosine kinase 3 ligand (Flt3L) ELISA Kit 小鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)試劑盒
ELISA 小鼠粒細胞集落刺激因子(mouse G-CSF) 分裝
CLIAKitforLDLELISAKit大鼠低密度脂蛋白
通用型N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKiths-CRP猴超敏C反應(yīng)蛋白