詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脊髓: | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8371 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔脊髓微血管內(nèi)皮分離自脊髓組織,;脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù),;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來(lái)處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息,。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,,在椎管里面,上端連接延髓,,兩旁發(fā)出成對(duì)的神經(jīng),,分布到四肢、體壁和內(nèi)臟,。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),,主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),,主要由有髓神經(jīng)纖維組成,;脊髓是許多簡(jiǎn)單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚,、肌肉和內(nèi)臟器官,。微血管又稱毛細(xì)血管,。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間,。平均直徑7-9微米,,數(shù)量極多,成網(wǎng)狀分布,。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成,,厚約0.5微米?;ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織,,其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等,。細(xì)的毛細(xì)血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔,,較粗的毛細(xì)血管由2-3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織,、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的毛細(xì)血管,,內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續(xù)毛細(xì)血管,;分布于內(nèi)分泌腺,、腎臟等處的毛細(xì)血管,除有縫隙連接外,,細(xì)胞本身有許多小孔,,(孔徑800-1000埃),稱有孔毛細(xì)血管,;分布于肝、脾,、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細(xì)血管,,管腔擴(kuò)大,稱血竇,。毛細(xì)血管的管壁薄,、通透性大、管徑細(xì)(8-10微米),、數(shù)量多,、血流速度慢,這些特點(diǎn)使其成為血液與組織液進(jìn)行物質(zhì)交換的場(chǎng)所,,又稱交換血管,。血竇(sinusoid)由毛細(xì)血管管腔擴(kuò)大而成,竇壁的一般結(jié)構(gòu)與毛細(xì)血管壁相同,,由單層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,,內(nèi)皮細(xì)胞膜上有窗孔,。不同器官的竇壁結(jié)構(gòu)各有差別。脾血竇的內(nèi)皮細(xì)胞間有較寬裂隙,;肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞是不連續(xù)的,,有較寬的細(xì)胞隙(0.1-0.5微米);肝,、脾血竇的基膜不完整或無(wú)基膜,,通透性比毛細(xì)血管大,較大的蛋白質(zhì)和血細(xì)胞可以通過(guò),。肝血竇壁內(nèi)有枯否細(xì)胞,,脾血竇內(nèi)外有巨噬細(xì)胞,這兩種細(xì)胞都有吞噬能力,,可吞噬清除血液中的異物,、細(xì)菌等有害物質(zhì),是機(jī)體單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的重要組成分,。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜,。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脊髓微血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脊髓微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、EGF,、bFGF,、IGF、VEGF,、Heparin,、Hydrocortisone、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔脊髓微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠 IgG(mouse IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) ADI
小鼠類胰島素樣生長(zhǎng)因子 -1 (mouse IGF-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) R&D
小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國(guó) R&D
小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a ) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
維甲酸相關(guān)孤兒受體α抗體
EHBP1L1蛋白抗體
CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein
Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated
IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated
CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein
IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Human aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 人水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
HumanApolipoproteinC3,ApoC3試劑盒人載脂蛋白C3(ApoC3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測(cè)定試劑盒(過(guò)氧亞硝基陰離子)20次
Humaoll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS1)試劑盒 ,,英文名: SOCS1 ELISA Kit
Mouse glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒
MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
HSV-IIgM單皰疹Ⅰ型病毒IgM(捕獲法二步法)
細(xì)胞IRAK4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-4大鼠白介素4
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行