兔精原干細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：泛素蛋白連接酶C抗體 人尿道上皮細(xì)胞 環(huán)指蛋白191抗體 小鼠氣管平滑肌細(xì)胞 MCTP1蛋白抗體 小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 NK細(xì)胞抑制性受體3DX1抗體 IEC-18大鼠回腸細(xì)胞

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產(chǎn)品名稱：兔精原干細(xì)胞

組織來源：睪丸

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：梭形,、圓形

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

兔精原干體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

細(xì)胞簡介：

兔精原干分離自睪丸組織,；精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞，是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞,。精原干細(xì)胞的一些優(yōu)勢使其成為動物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞,。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究,，精子發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染,，異體、異種移植技術(shù)的實際應(yīng)用,，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,，以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi),，精子發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,，精原干細(xì)胞（SSCs）一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量，另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細(xì)胞直至后生成精子,。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處,，是哺乳動物精子發(fā)生的原始細(xì)胞，也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立,，在生物學(xué),、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景,。精原干細(xì)胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞，具有自我更新能力和多向分化潛能,，是哺乳動物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞,。

方法簡介：

實驗室分離的兔精原干采用先機(jī)械吹打、后消化,，結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的兔精原經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理,？

1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。

4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒

小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒

小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒

1號染色體開放閱讀框54抗體

智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體

CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein

玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)

PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein

CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白

RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白

Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原

CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白

REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein

IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein

小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保護(hù)素(OPG)試劑盒

Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)pcr檢測試劑盒分裝

ChickenHeatShockProtein20,HSP-20試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CASPASE-9蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔精原干細(xì)胞大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒 ，英文名： BMP-4 ELISA Kit

Pig aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒

2型脊髓灰質(zhì)病毒(PV-2)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIS/AMH)ELISAKit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素

體液離子(K)濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次

ELISAKitE犬雌激素