化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱(chēng)：兔頸動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源：頸動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
兔頸動(dòng)脈血管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔頸動(dòng)脈平滑肌分離自頸動(dòng)脈組織；頸動(dòng)脈存在于脊椎動(dòng)物頸部的動(dòng)脈,。有頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,。前者分布至頭頂部和顏面部。后者進(jìn)入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi),。在發(fā)生時(shí),，鰓弓中不形成鰓的下頜弓，所以,，從大動(dòng)脈也不分入鰓動(dòng)脈和出鰓動(dòng)脈,。從腹大動(dòng)脈的前方發(fā)出頸外動(dòng)脈，頸內(nèi)動(dòng)脈是通向第三鰓弓的血管延伸而形成的,，但在某些魚(yú)類(lèi),、有尾兩棲類(lèi)和爬行類(lèi)中,，這一血管也將一些血液送至大動(dòng)脈根。其它的高等脊椎動(dòng)物的大動(dòng)脈根,，在第三、第四大動(dòng)脈弓之間消失,，所以,，其第三大動(dòng)脈弓形成純粹的頸動(dòng)脈。在相當(dāng)于第三,、第四大動(dòng)脈弓之間的腹行大動(dòng)脈的部分稱(chēng)為頸總動(dòng)脈干（common co-rotid trunk）,；高等脊椎動(dòng)物，是由頸總動(dòng)脈干分為左,、右頸總動(dòng)脈,，然后再各分支為頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈。頸動(dòng)脈是將血液由心臟輸送至頭,、面,、頸部的大血管，是腦的主要供血血管之一,，由內(nèi)膜,、平滑肌層及外膜層構(gòu)成。與其相關(guān)常見(jiàn)疾病為頸動(dòng)脈狹窄,，頸動(dòng)脈狹窄導(dǎo)致的缺血癥狀主要包括,，頭暈、記憶力,、定向力減退,、意識(shí)障礙、黑朦,、偏側(cè)面部和/或肢體麻木和/或無(wú)力,、伸舌偏向、言語(yǔ)不利,、不能聽(tīng)懂別人說(shuō)的話等,。研究頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)，為研究治療頸動(dòng)脈狹窄提供一個(gè)細(xì)胞模型具有重要意義,。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠頸動(dòng)脈血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔頸動(dòng)脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISAKit ELISA
兔鉤端IgG(LepIgG)ELISAKit ELISA
兔原片段F1+2(F1+2)ELISAKit ELISA
兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISAKit ELISA
14-3-3 sigma 重組鼠單克隆抗體
磷酸化叉頭蛋白家族抗體
INHBA重組小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 Protein
Agrin peptide 聚集蛋白抗原 0.5mgAgrin peptide 聚集蛋白抗原
PSG6重組人 PSG6 / PSG10 蛋白 Protein
GPA33 Protein Human 重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白
TNFRSF1A Protein Rat 重組大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Agrin peptide 聚集蛋白抗原 0.5mgAgrin peptide 聚集蛋白抗原
GPA33 Protein Human 重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白
INHBA重組小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 Protein
TNFRSF1A Protein Rat 重組大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PSG6重組人 PSG6 / PSG10 蛋白 Protein
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat adrenomedullin (ADM) ELISA Kit 大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒
HumanCalretinin,CRELISAKit 人鈣結(jié)合蛋白(CR)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
HumanCaveolin-1,Cav-1試劑盒人窖蛋白(Cav-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)T45品系試劑盒20次
HumanSialicacid,SAELISAKit人唾液酸(SA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔頸動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞大鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒 ，英文名： LTD4 ELISA Kit
Mouse beta 2 glycoprotein aibody IgA/G/M (1 beta 2-GP1 IgA/G/M) ELISA Kit 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)試劑盒
ELISA 小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin) 分裝
CLIAKitforIRAP(HumanICEprotease-activatingfactor)ELISAKit人ICE蛋白酶激活因子
通用型非變性裂解液適合各種細(xì)胞native蛋白
ELISAKitNE大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代,；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
化工儀器網(wǎng)