詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
淋巴管 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8383 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔淋巴血管內(nèi)皮分離自淋巴血管組織,;淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成,。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,,但管徑較細(xì),,管壁較薄,,瓣膜較多且發(fā)達(dá),,外形呈串珠狀,。淋巴管根據(jù)其位置分為淺,、深二種。它們管位于皮下,,常與淺靜脈伴行,,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴,。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支,。淋巴管在向心行程中,,通常經(jīng)過(guò)一個(gè)或多個(gè)淋巴結(jié),從而把淋巴細(xì)胞帶入淋巴液,。主要功能是濾過(guò)淋巴液,,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng),。當(dāng)局部感染時(shí),,細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大,。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞(LEC)是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮,,是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),,參與維持體液平衡,調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞再循環(huán)和機(jī)體的免疫反應(yīng)和組織液及蛋白質(zhì)的運(yùn)輸,,在疾病過(guò)程中也起著重要作用,。近年研究表明,LEC還在傷口愈合,、淋巴管水腫和炎癥擴(kuò)散等病理過(guò)程中起重要作用,,而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能:①調(diào)節(jié)體液,、蛋白和組織壓力平衡,;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤,;②淋巴管炎,;③淋巴結(jié)核。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔淋巴血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔淋巴血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔淋巴血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng),。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)試劑盒
小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)試劑盒
小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒
小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒
少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體
3-磷酸甘油醛脫氫酶(內(nèi)參)重組兔單克隆抗體
IgG3重組小鼠 IgG3-Fc 蛋白 Protein
表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)重組蛋白 Recombinant Surfactant Associated Protein J (SPJ)
CARHSP1重組人 CARHSP1 蛋白 Protein
CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白
EDAR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EDAR 蛋白
Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)
CD46 Protein Human 重組人 CD46 蛋白
FCGR3重組小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 Protein
CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CD1B重組人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Human kaliuretic peptide (KP) ELISA Kit 人利尿肽(KP)試劑盒
HumanAcrineOrange,AOELISAKit 人橙(AO)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
bullfroggrowthhormone,GH試劑盒牛蛙生長(zhǎng)激素(GH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚(yú)類(lèi)受精卵細(xì)胞凍存試劑盒(超低溫)50次
MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠血管非性蛋白1(VNN1)試劑盒 ,,英文名: VNN1 ELISA Kit
Plas of 25 hydroxy vitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA kit E 植物25羥基3(25(OH)試劑盒D3/25 HVD3)試劑盒E
MousePlateletFactor4,PF-4ELISAKit 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHumanapelin12,AP12ELISAKit人apelin12
細(xì)胞ERK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitMCP-2/CCL8大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2