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參考價	￥1-￥6200	/件

產(chǎn)品簡介

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5×105cells/T25
貨號	YS-01X8389	主要用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

兔卵泡顆粒細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：活化B淋巴細(xì)胞因子1抗體 SFXN5蛋白抗體 NCI-H1869人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞核受體相互作用蛋白2抗體 HCC4006人肺腺癌細(xì)胞磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 RERF-LC-Ad2人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞大鼠肺泡巨噬細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔卵泡顆粒細(xì)胞

兔卵泡顆粒細(xì)胞

商品屬性：

組織來源	產(chǎn)品規(guī)格	細(xì)胞形態(tài)	貨號
卵巢	5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶	上皮細(xì)胞樣	YS-01X8389

細(xì)胞簡介：

兔卵泡顆粒（卵巢顆粒細(xì)胞）分離自卵巢組織,；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化）,，呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,，卵泡呈黃色,，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能,。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織,。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成,；髓質(zhì)位于中央,，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管,、淋巴管和神經(jīng),。卵巢顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞，其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動,、發(fā)育,、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動,。卵巢顆粒細(xì)胞是卵泡內(nèi)的大細(xì)胞群,，也是主要的功能細(xì)胞，卵泡發(fā)育的顯著標(biāo)志之一就是顆粒細(xì)胞迅速生長及增殖,，而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細(xì)胞凋亡引起,，尤其在卵泡發(fā)育后期，此外,，顆粒細(xì)胞還與卵泡膜細(xì)胞共同完成卵巢激素的合成,，維持著有利于卵母細(xì)胞生長和成熟的微環(huán)境。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4,、胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>

　　7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；

　　2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

　　3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長,；

　　5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔卵泡顆粒采用先機(jī)械分離,，而后膠原酶消化,，后差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔卵泡顆粒經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

兔卵泡顆粒體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔卵泡顆粒細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存：

細(xì)胞傳代步驟

細(xì)胞凍存步驟

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

兔卵泡顆粒細(xì)胞