詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔毛囊干細(xì)胞
組織來(lái)源:毛囊
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF,、bFGF、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形,、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔毛囊干體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔毛囊干分離自皮膚毛囊組織,;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭,,中心是一根毛發(fā),,立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔,。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊干細(xì)胞是在毛囊外根鞘隆突部中的一種細(xì)胞,。毛囊干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞,,在體內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài),在體外培養(yǎng)作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力,。研究發(fā)現(xiàn),,毛囊干細(xì)胞具有多向分化潛能,它可以分化成表皮,、毛囊,、皮脂腺,參與皮膚創(chuàng)傷愈合的過程,。毛囊干細(xì)胞和其它成體干細(xì)胞一樣,,具有慢周期性、未分化性,、自我更新和體外增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),。毛囊干細(xì)胞分化經(jīng)毛囊干細(xì)胞(hair follicle stem cells,FSC),、短暫增殖細(xì)胞(transit amplifying cells,,TAC)有絲分裂后分化細(xì)胞(postmitotic differentiating cells,PDC)三個(gè)階段,。毛囊干細(xì)胞在光鏡下呈立方形,,細(xì)胞體積小,核漿比率大,,表面光滑,,皺褶少,又被稱為非鋸齒形細(xì)胞,,細(xì)胞體積的增大與增殖能力呈負(fù)相關(guān),。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞表面有少許微絨毛,細(xì)胞核存在許多卷曲,,染色質(zhì)彌散分布,,這些形態(tài)特征均表現(xiàn)出原始細(xì)胞的特性,。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔毛囊干采用膠原酶-聯(lián)合消化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔毛囊經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒
小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)試劑盒
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒
3號(hào)染色體開放閱讀框17抗體
蛋白激酶C抗體
CST6重組小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 Protein
半胱蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白 Recombinant Cystatin 3 (CST3)
CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 Protein
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KLRC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Angiotensin II receptor(Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor(Ang II ) 血管緊張素Ⅱ受體(抗原)
CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白
FZD10重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein
IL20RB Protein Rat 重組大鼠 IL20RB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TEK重組人 Tie2 / CD202b / TEK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
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Humanpro-gasin-releasingpeptide,ProGRPELISAKit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
Human20-hydroxyeicosateaenoicacid,12-HETE試劑盒人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母纖維二糖酶(cellobiase)活性比色法定量試劑盒20次
MouseApolipoproteinH,Apo-HELISAKit小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔毛囊干細(xì)胞大鼠三葉因子3(TFF3)試劑盒 ,英文名: TFF3 ELISA Kit
Mouse signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)試劑盒
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CLIAKitforHABPELISAKit大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白
細(xì)胞半胱蛋白酶-7(CASPASE-7)活性熒光定量試劑盒20次
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