化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：兔腎小球上皮細(xì)胞
組織來源：腎
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
兔腎小球上皮體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介：
兔腎小球上皮分離自腎組織,；腎臟是機(jī)體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、等,，以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3,、前列腺素,、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造,。血液經(jīng)由入球小動脈進(jìn)入腎小球,。腎小球上皮細(xì)胞是由間充質(zhì)細(xì)胞分化發(fā)育、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細(xì)胞,，是腎小球的固有細(xì)胞之一,，也是構(gòu)成腎小球?yàn)V過膜的重要組成部分。腎小球上皮細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)和功能是腎單位濾過及腎小球微環(huán)境穩(wěn)定的重要保障,。腎小球?yàn)V過膜的外層為上皮細(xì)胞層,，厚約40nm，腎小球上皮細(xì)胞是腎小囊的臟層上皮細(xì)胞,，貼附于腎小球血管外側(cè)基底膜上,。上皮細(xì)胞又稱足細(xì)胞，足細(xì)胞的不規(guī)則突起為足突,，其間有許多狹小間隙,，血液經(jīng)濾過膜過濾入腎小球囊,。腎小球上皮細(xì)胞可通過合成和分泌腎上腺髓質(zhì)肽抑制系膜細(xì)胞增殖，腎上腺髓質(zhì)肽作為一種重要的旁分泌因子,，可保持腎小球微環(huán)境穩(wěn)定,，并參與腎小球的炎癥過程。體外培養(yǎng)的腎小球上皮細(xì)胞對各型腎小球腎炎具有重要的研究價值,。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎小球上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腎小球上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
人載脂蛋白E試劑盒 人載脂蛋白E試劑盒 人載脂蛋白E試劑盒,，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人載脂蛋白E試劑盒,、人載脂蛋白E 試劑盒
人載脂蛋白C3試劑盒 人載脂蛋白C3試劑盒 人載脂蛋白C3試劑盒,，，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人載脂蛋白C3試劑盒,、人載脂蛋白C3 試劑盒
人載脂蛋白B100試劑盒 人載脂蛋白B100試劑盒 人載脂蛋白B100試劑盒，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人載脂蛋白B100試劑盒、人載脂蛋白B100 試劑盒
人載脂蛋白A5試劑盒 人載脂蛋白A5試劑盒 人載脂蛋白A5試劑盒,，,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人載脂蛋白A5試劑盒,、人載脂蛋白A5 試劑盒
泛肌動蛋白重組兔單抗
溶質(zhì)載體家族22成員10抗體
ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein
ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白
FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 僀?僀
Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)
ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白
ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein
豚鼠白介素18(IL-18)試劑盒 ,，英文名： IL-18 ELISA Kit
Human ubiquitin ligase (E3/UBPL) ELISA Kit 人泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒
rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforBeta-CGELISAKit大鼠絨毛膜β
細(xì)菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量試劑盒20次
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit兔血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔腎小球上皮細(xì)胞人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA 試劑盒
Human ansfer factor (TF) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)移因子(TF)試劑盒
Humahymidylatesyhetase,TSELISAKit 人胸苷酸合成酶(TS)pcr檢測試劑盒分裝
HumanIerleukin17,IL-17試劑盒人白介素17(IL-17)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humaniestinalfattyacidbindingprotein，iFABPELISAKit人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
化工儀器網(wǎng)