詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X8432 |
細胞簡介:
兔腎臟微血管內(nèi)皮分離自腎臟,;腎臟是兔的重要器官,它的基本功能是生成尿液,,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水分及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、等,,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素、促紅細胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,,使新陳代謝得以正常進行,。腎臟內(nèi)部的結構,可分為腎實質(zhì)和腎盂兩部分。在腎縱切面可以看到,,腎實質(zhì)分內(nèi)外兩層:外層為皮質(zhì),,內(nèi)層為髓質(zhì)。腎皮質(zhì)位于腎實質(zhì)表層,,富含血管,,新鮮時呈紅褐色,由一百多萬個腎單位組成,。每個腎單位由腎小體和腎小管所構成,,部分皮質(zhì)伸展至髓質(zhì)錐體間,成為腎柱,。腎髓質(zhì)位于腎皮質(zhì)的深面,,血管較少,色淡紅,,為10-20個錐體所構成,。腎錐體在切面上呈三角形。錐體底部向腎凸面,,向腎門,,錐體主要組織為集合管,錐體稱腎乳頭,,每一個乳頭有10-20個乳頭管,,向腎小盞漏斗部開口。在腎竇內(nèi)有腎小盞,,為漏斗形的膜狀小管,,圍繞腎乳頭。腎錐體與腎小盞相連接,。每腎有7-8個腎小盞,,相鄰2-3個腎小盞合成一個腎大盞。每腎有2-3個腎大盞,,腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂,。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細,移行為輸尿管,。腎單位是腎臟結構和功能的基本單位,。腎小體包括腎小球和腎小囊。腎小體內(nèi)有一個毛細血管團,,稱為腎小球,,腎小球是個血管球。它由腎動脈分支形成,。腎小球外有腎小囊包繞,。腎小囊分兩層,,兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通。腎小管匯成集合管,。若干集合管匯合成乳頭管,,尿液由此流入腎小盞。微血管又稱毛細血管,。分布于各種組織和細胞間的微細的血管,。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米,,數(shù)量極多,,成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成,,厚約0.5微米,。基膜外面有薄層結締組織,,其中有纖維細胞,、巨噬細胞和周細胞等。細的毛細血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔,,較粗的毛細血管由2-3個內(nèi)皮細胞圍成,。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結締組織中的毛細血管,,內(nèi)皮細胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),,稱連續(xù)毛細血管;分布于內(nèi)分泌腺,、腎臟等處的毛細血管,,除有縫隙連接外,細胞本身有許多小孔,,(孔徑800-1000埃),,稱有孔毛細血管;分布于肝,、脾,、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細血管,,管腔擴大,,稱血竇。毛細血管的管壁薄,、通透性大,、管徑細(8-10微米)、數(shù)量多,、血流速度慢,,這些特點使其成為血液與組織液進行物質(zhì)交換的場所,,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細血管管腔擴大而成,,竇壁的一般結構與毛細血管壁相同,,由單層內(nèi)皮細胞構成,內(nèi)皮細胞膜上有窗孔,。不同器官的竇壁結構各有差別,。脾血竇的內(nèi)皮細胞間有較寬裂隙;肝血竇內(nèi)皮細胞是不連續(xù)的,,有較寬的細胞隙(0.1-0.5微米),;肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜,,通透性比毛細血管大,,較大的蛋白質(zhì)和血細胞可以通過。肝血竇壁內(nèi)有枯否細胞,,脾血竇內(nèi)外有巨噬細胞,,這兩種細胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物,、細菌等有害物質(zhì),,是機體單核巨噬細胞系統(tǒng)的重要組成分。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應將原代細胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的兔腎臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化,,結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔腎臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS,、EGF,、bFGF,、IGF,、VEGF,、Heparin、Hydrocortisone,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔腎臟微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素10(IL-10)試劑盒
小鼠白介素1(IL-1)試劑盒
小鼠八聚體結合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)試劑盒
小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)試劑盒
蛛毒素受體2抗體
艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體
BCHE重組小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein
Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
APOM重組人 APOM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
DDR1 Protein Rat 重組大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
Beta-casein( Beta-casein 0.5mgBeta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)
EREG Protein Human 重組人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)
BCHE重組小鼠 BCHE / Butyrylcholinesterase 蛋白 Protein
DDR1 Protein Rat 重組大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白
APOM重組人 APOM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠A(CsA)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒
humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)pcr檢測試劑盒分裝
Humanai-myelinaibodyIgA,AMAIgA試劑盒人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量試劑盒20次
Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二0酸尿核苷葡糖酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔腎臟微血管內(nèi)皮細胞大鼠腎酶(RNLS)試劑盒 ,,英文名: RNLS ELISA Kit
Mouse iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 小鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒
Ratcoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit 大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHBsAg乙型肝表面抗原
細胞β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性生物發(fā)光法定量試劑盒20次
SheepIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit綿羊白介素2受體(IL-2R)試劑盒規(guī)格:96T/48T