詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞
組織來源:視網(wǎng)膜
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含FBS,、B-27 Supplement、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):神經(jīng)元細胞樣
傳代特性:屬于終末分化細胞,;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞簡介:
兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)分離自視網(wǎng)膜組織,;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞,、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層,、視錐、視桿細胞層,、外界膜,、外顆粒層、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層,、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,,有感光作用,;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成,。第一神經(jīng)元是視細胞層,專司感光,,它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處多,。第二層叫雙節(jié)細胞,,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,負責(zé)聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細胞層,,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,,在黃斑區(qū),,其分辨能力強。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞貼壁后呈單層排列,,部分細胞聚集成團,,細胞呈圓形或橢圓形,核圓且相對透明,,有些細胞膜上伸出短而小的突起,;該細胞為高度分化細胞,在體外屬于不增殖群,。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞,,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的死亡可導(dǎo)致視功能逆損傷,研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞損害的細胞學(xué)和分子生物學(xué)機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究,。
方法簡介:
實驗室分離的兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)采用-膠原酶聯(lián)合消化法,,結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細胞如何處理,?
1、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒 48T
豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
8號染色體開放閱讀框72抗體
豬藍耳病病毒GP5蛋白抗體
TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原
ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 僀?僀
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原
BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白
ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
豬血栓素A2(TXA2)試劑盒
Human tendon protein R (TN-R) ELISA Kit 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒
Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒分裝
CLIAKitforai-toxIgM(Humanai-toxoplasmaIgGaibody)ELISAKit人抗弓形體IgM抗體
血小板因子4(PlateletFactorIV)活性比色法定量試劑盒20次
Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒
兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 ,,英文名: GAD-Ab-IgM ELISA Kit
Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)試劑盒
粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M
體液賴(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitAE禽腦脊髓