詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8438 |
細(xì)胞簡介:
兔胎盤絨毛膜分離自胎盤組織,;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性,。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,外裹合體滋養(yǎng)層,,稱初級干絨毛,。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,使初級干絨毛變成了次級干絨毛,。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,,并與胚體內(nèi)的血管相通時,次級干絨毛改稱三級干絨毛,。三級干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼,。隨著胚胎發(fā)育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合,。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔胎盤絨毛膜體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒
人脂蛋白α(Lp-α)試劑盒
人脂蛋白a(Lp-a)試劑盒
人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)試劑盒
單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(小鼠)
牛纖維蛋白原抗體
TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷
ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白
EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7僀?僀
BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷
ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白
TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白
ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
豚鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 ,英文名: LTB4 ELISA Kit
Two lymphoid tissue chemokine (SLC/CCL21) ELISA Kit 人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)試劑盒
rabbitSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 兔子S100蛋白(S-100)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽受體
細(xì)菌鹽肉湯500毫升
RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔胎盤絨毛膜細(xì)胞人粘蛋白3(MUC3)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)試劑盒
HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人組織蛋白去乙?;?span>(HD)pcr檢測試劑盒分裝
Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAP試劑盒人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量試劑盒20次
Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor,,LIFRELISAKit人白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行