詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
椎間盤 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X8441 |
細(xì)胞簡介:
兔退行性椎間盤髓核分離退行性椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,,分為中央部的髓核,,富于彈性的膠狀物質(zhì);周圍部的纖維環(huán),,由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列,。上下有軟骨板,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,,下面骺環(huán)中間的骨面,。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,,位于髓核的四周,。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷,。髓核,,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì),。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,,即使到了老年,其含水量也在70%上下,。髓核在出生時體積大而松散,,位于椎間盤的中央,至成年時位置移至椎間盤的中后部,;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體,、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長,,髓核中的蛋白多糖解聚增多,,水分逐漸減少,,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
實驗室分離的兔退行性椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔退行性椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS,、EGF,、Transferrin、Selenium Solution,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%
兔退行性椎間盤髓核體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)試劑盒
小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒
小鼠抗IVIgG抗體試劑盒
FSP-1抗體
富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體
EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein
CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原
PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標(biāo)簽) Protein
CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白
TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白
CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原
CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白
EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein
TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白
PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標(biāo)簽) Protein
小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA pcr檢測試劑盒
Human glucose 6 phosphate isomerase (GPI) ELISA Kit 人葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒
Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)pcr檢測試劑盒分裝
Humanacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1試劑盒人酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂肪肝比色法定量試劑盒
MouseannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔退行性椎間盤髓核細(xì)胞大鼠促甲狀腺激素(TSH)試劑盒 ,英文名: TSH ELISA Kit
Mouse procollagen C N-terminal peptide (C I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒
ELISA 小鼠皮質(zhì)酮(mouse Coicosterone) 分裝
CLIAKitforLH(Humanleoopichormone)ELISAKit
通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitPF-4/CXCL4血小板因子4