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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療！
產(chǎn)品名稱：兔外周血樹突狀細(xì)胞 (未成熟DC細(xì)胞)
組織來源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形,、梭形,、多角形,，形態(tài)多樣
傳代特性：屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
兔外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔外周血DC分離自外周血,，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念,。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長，在GM-CSF,、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多,，亦可見少量短刺狀突,，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強的遷移能力,，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα,、LPS等誘導(dǎo)而成,，多數(shù)呈懸浮生長， 細(xì)胞呈圓形,，細(xì)胞體積進一步增大,，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起（高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ），伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞,。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟,。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志，主要通過形態(tài)學(xué),、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志,、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物（MHC）以及CD80、CD86等共刺激分子,，進而激活T淋巴細(xì)胞,，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動,、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強的抗原攝取加工能力,，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化,、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答，不能激活T細(xì)胞的第二信號,，可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80,、CD86,、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低，一般在30%以下,。
方法簡介：
實驗室分離的兔外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞,、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔外周血樹突狀(未成熟DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,、細(xì)胞形態(tài)等綜合鑒定，純度可達(dá)80%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b）,、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請拍照,，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔乙酰(ACh)試劑盒
兔合成酶(NOS)試劑盒
兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒
兔血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒
γ-谷氨酰羧化酶抗體
磷酸化腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA1抗體
CD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein
Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)
ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein
GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白
GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45 0.5mgCaspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬-胱特異性蛋白酶家族(抗原)
GSTM2 Protein Human 重組人 GSTM2 / GST4 蛋白
CD1D重組小鼠 CD1D / R3G1 蛋白 Protein
GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ENO2重組人 NSE / ENO2 / Enolase 2 蛋白 Protein
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA pcr檢測試劑盒
Human vitamin D receptor (VD R) ELISA Kit 人受體(VD R)試劑盒
Humanai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit 人抗透明帶抗體(aZP)pcr檢測試劑盒分裝
Humancholesterol,CH試劑盒人(CH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
紫外線處理DNA損傷彗星熒光試劑盒20次
HumansecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit人分泌型0脂酶A2(sPLA2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔外周血樹突狀細(xì)胞 (未成熟DC細(xì)胞)大鼠顆粒酶A(GZMA)試劑盒 ，英文名： GZMA ELISA Kit
Mouse apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒
RatPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforFSH促卵泡生成素
細(xì)胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)總活性熒光定量試劑盒20次
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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