詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔下腔靜脈內(nèi)皮細胞
組織來源:下腔靜脈
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔下腔靜脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞簡介:
兔下腔靜脈內(nèi)皮分離自下腔靜脈組織;下腔靜脈是體內(nèi)大的靜脈,,收集下肢,、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左,、右髂總靜脈匯合而成,,匯合部位多在第5腰椎水平,少數(shù)平第4腰椎,。下腔靜脈位于脊柱的右前方,,沿腹主動脈的右側(cè)上行,經(jīng)肝的腔靜脈溝,、穿 膈的腔靜脈孔,,開口于右心房。下腔靜脈的前面有肝,、胰頭,、十二指腸水平部,、右睪丸動脈及小腸系膜根越過,。后面為有膈腳,、第1~4腰椎、有腰交感干和腹主動脈的壁支,。右側(cè)與 腰大肌,、右腎、右腎上腺相鄰,,左側(cè)為腹主動脈,。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈,、腎靜脈,、右腎上腺靜脈、肝靜脈,、膈下靜脈和腰靜脈,,其中大部分 屬支與同名動脈伴行。
方法簡介:
實驗室分離的兔下腔靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔下腔靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a),、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b),、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理,?
1,、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管生長素 英文名稱: Angiogenin 英文縮寫: ANG 規(guī)格:
血管生成素-2 英文名稱: Angiopoietin-2 英文縮寫: ANG2 規(guī)格:
血管生成素相關(guān)生長因子 英文名稱: Angiopoietin Growth Factors 英文縮寫: AGF 規(guī)格:
載脂蛋白P 英文名稱: Apolipoprotein P 英文縮寫: ApoP 規(guī)格:
B淋巴細胞基因1抗體
核糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體
SERPINA11重組小鼠 SerpinA11 蛋白 Protein
cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原 0.5mgcath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CCL21 Protein Human 重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白
PDGFRA Protein Rat 重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白
cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原 0.5mgcath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原
CCL21 Protein Human 重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白
SERPINA11重組小鼠 SerpinA11 蛋白 Protein
PDGFRA Protein Rat 重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA pcr檢測試劑盒
Human ai ophoblast aibody (ATA) ELISA Kit 人抗滋養(yǎng)膜細胞抗體(ATA)試劑盒
Humanlambdaimmunoglobulinlightchain,λ-IgLCELISAKit 輕鏈lambda(λ-IgLC)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitfor8-OHdGELISAKit大鼠8羥基脫氧鳥苷
乙酰酯酶活性抑制劑篩選比色法試劑盒20次
MouseMucin-7,MUC7ELISAKit小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔下腔靜脈內(nèi)皮細胞大鼠膽囊收縮素(CCK)試劑盒 ,英文名: CCK ELISA Kit
Porcine platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 豬血小板活化因子(PAF)試劑盒
ELISA 小鼠Active Caspase-7 分裝
CLIAKitforLPLELISAKit大鼠脂蛋白脂酶
通用型1毫升1厘米光徑玻璃比色皿1個
ELISAKitDEV雞病毒性腸病毒