詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:兔小腸Cajal間質(zhì)細胞
組織來源:小腸
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:不建議傳代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔小腸Cajal間質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
兔小腸Cajal間質(zhì)分離自小腸組織,;小腸位于腹中,,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,,是食物消化吸收的主要場所,。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,,下接盲腸,,分為十二指腸、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,,因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了,。小腸管壁由粘膜、粘膜下層,、肌層和漿膜構(gòu)成,。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,,絨毛根部的上皮下陷至固有層,,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切,;構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞,、潘氏細胞和未分化細胞,。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,,不形成紋狀緣,。Cajal間質(zhì)細胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質(zhì)細胞,,是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞,與肌細胞以及末梢神經(jīng)元有著緊密的關(guān)系,,具有激發(fā)和促進胃腸蠕動的作用,。借助于電子顯微鏡技術(shù),清楚觀察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細結(jié)構(gòu),;應用免疫熒光等生化技術(shù),,發(fā)現(xiàn)了其特殊表達的c-kit蛋白;利用電生理技術(shù),,得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關(guān),。多年來,學者逐漸在胃腸道,、膽道,、膀胱、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡,,并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機制,。
方法簡介:
實驗室分離的兔小腸Cajal間質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔小腸Cajal間質(zhì)經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
a)、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理,?
1,、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代,;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔內(nèi)皮素
-1(rabbit ET-1) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔降解產(chǎn)物(rabbit FDP) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔促卵泡素(rabbit FSH) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
兔堿性成纖維生長因子(rabbit b-FGF/FGF-2) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
ADP核糖基化樣因子8B抗體
凋亡相關(guān)蛋白4抗體
DLL4重組小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 Protein
CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗原
NGFR重組人 NGFR/ P75 蛋白 Protein
HK3 Protein Human 重組人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 標簽)
IL17RA Protein Rat 重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 僀?僀
CC16(Clara cell protein 16 0.5mgCC16(Clara cell protein 16) peptide 克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗原
HK3 Protein Human 重組人 Hexokinase-3 / HK3 蛋白 (His & GST 標簽)
DLL4重組小鼠 DLL4 / Delta4 蛋白 Protein
IL17RA Protein Rat 重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標簽)
NGFR重組人 NGFR/ P75 蛋白 Protein
小鼠NOD樣受體-2(NOD-2)pcr檢測試劑盒
Rat hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 大鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒
HumanCoisolELISAKit 人(Coisol)pcr檢測試劑盒分裝
HumanCollagenaoaibody,CLA試劑盒人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶比色法定量試劑盒20次
Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit人重組激活基因2(RAG-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔小腸Cajal間質(zhì)細胞大鼠乳酸脫氫酶A(LDHA)試劑盒 ,,英文名: LDHA ELISA Kit
Mouse angiotensin I (Ang- I) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒
RatChorionicGonadoophinβ,β-CGELISAKit 大鼠絨毛膜β(β-CG)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGzms-B(HumangranzymesB)ELISAKit人顆粒酶B
細胞同酸激酶(PK)總活性比色法定量試劑盒20次
RatUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit大鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒規(guī)格:96T/48T