詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:兔小氣道平滑肌細(xì)胞
組織來源:小氣道
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含FBS、EGF,、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
兔小氣道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介:
兔小氣道平滑肌分離自小氣道組織,;臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小,,但易阻塞的特點(diǎn),。在平靜吸氣時,空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部,,產(chǎn)生渦流,。由于小氣道已無軟骨支持,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,,管腔通暢性不象軟骨性氣道,,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層,,作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用,。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng),、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御,、表達(dá)粘附分子,并可能通過HLA-DR表達(dá)呈遞抗原,;它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡,。許多呼吸道疾病,,如哮喘、支氣管炎,、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,,都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞;小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇,。小氣道平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。小氣道的生理功能特點(diǎn):①小氣道阻力?。虎跉饬魉俣嚷?;③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例,。小氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①保持氣道張力維持小氣道形態(tài);②肺小氣道進(jìn)行氣體交換,,病變可引起換氣功能障礙;③炎癥,、痰液阻塞或當(dāng)氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時容易造成小氣道閉合,、萎陷。小氣管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①支氣管炎,;②肺氣腫,;③慢性阻塞性肺疾病,。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理,?
1、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體 -1(mouse VEGF-R1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體 2(mouse VEGF-R2) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
大鼠Active Caspase-3 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
大鼠Active Caspase-7 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
APC標(biāo)記人CD105單克隆抗體
表皮生長因子受體單克隆抗體
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽
STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadh僀?僀
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein
CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白
STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA pcr檢測試劑盒
Human lymphotoxin alpha (LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α(LTA)試劑盒
Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 人6-羥多巴胺(6-OHDA)pcr檢測試劑盒分裝
Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAP試劑盒雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔小氣道平滑肌細(xì)胞大鼠蛋白激酶C(PKC)試劑盒 ,英文名: PKC ELISA Kit
Pig angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒
病毒H7亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLp-PL-A2(Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2
通用石蠟切片HRP酶聯(lián)檢測封閉溶液10毫升
ELISAKitHSVⅡ-Ab雞單皰疹病毒Ⅱ型抗體