兔小氣道平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 兔肌腱干細(xì)胞 FRMD6蛋白抗體 HBMEC人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 鋅指蛋白143抗體 小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 突觸糖蛋白2抗體 SVEC4-10 (小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞)

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產(chǎn)品名稱：兔小氣道平滑肌細(xì)胞

組織來源：小氣道

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基,，含FBS,、EGF,、bFGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

兔小氣道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

細(xì)胞簡介：

兔小氣道平滑肌分離自小氣道組織,；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點(diǎn),。在平靜吸氣時(shí),，空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部，產(chǎn)生渦流,。由于小氣道已無軟骨支持,，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道,，易于受胸腔的壓力變化的影響,。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用,。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,，這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御,、表達(dá)粘附分子,，并可能通過HLA-DR表達(dá)呈遞抗原；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡,。許多呼吸道疾病,，如哮喘、支氣管炎,、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,，都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞；小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇,。小氣道平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。小氣道的生理功能特點(diǎn)：①小氣道阻力??；②氣流速度慢；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例,。小氣管平滑肌細(xì)胞主要功能：①保持氣道張力維持小氣道形態(tài),；②肺小氣道進(jìn)行氣體交換，病變可引起換氣功能障礙,；③炎癥,、痰液阻塞或當(dāng)氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時(shí)容易造成小氣道閉合、萎陷,。小氣管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化：①支氣管炎,；②肺氣腫；③慢性阻塞性肺疾病,。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

收到細(xì)胞如何處理,？

1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。

4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體 -1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體 2(mouse VEGF-R2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

大鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

大鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA   試劑盒   組裝/原裝

APC標(biāo)記人CD105單克隆抗體

表皮生長因子受體單克隆抗體

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadh僀?僀

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 Protein

CDH13 Protein Rat 重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白

STAT6重組人 STAT6 蛋白 Protein

小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA pcr檢測試劑盒

Human lymphotoxin alpha (LTA) ELISA Kit 人淋巴毒素α(LTA)試劑盒

Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 人6-羥多巴胺(6-OHDA)pcr檢測試劑盒分裝

Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAP試劑盒雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞CASPASE-6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousehepaticlipase,HLELISAKit小鼠肝脂酶(HL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔小氣道平滑肌細(xì)胞大鼠蛋白激酶C(PKC)試劑盒 ,，英文名： PKC ELISA Kit

Pig angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒

病毒H7亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLp-PL-A2(Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2)ELISAKit小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2

通用石蠟切片HRP酶聯(lián)檢測封閉溶液10毫升

ELISAKitHSVⅡ-Ab雞單皰疹病毒Ⅱ型抗體