詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
心臟 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8457 |
細胞簡介:
兔心臟微血管周分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,,左心房,、左心室、右心房,、右心室四個腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),,這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流,。心臟的作用是推動血液流動,,向器官、組織提供充足的血流量,,以氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),,并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機鹽,、尿素和尿酸等),,使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力,、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義,。近年來大量研究表明,,心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素,、炎癥因子及病毒等重要靶位,,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介:
實驗室分離的兔心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔心臟微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔心臟微血管周體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒,,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒,、小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒
小鼠血管緊張素原試劑盒 小鼠血管緊張素原試劑盒 小鼠血管緊張素原試劑盒,,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素原試劑盒、小鼠血管緊張素原試劑盒
小鼠血管緊張素試劑盒 小鼠血管緊張素試劑盒 小鼠血管緊張素試劑盒,,,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素試劑盒,、小鼠血管緊張素試劑盒
小鼠血管活性腸肽試劑盒 小鼠血管活性腸肽試劑盒 小鼠血管活性腸肽試劑盒,,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管活性腸肽試劑盒,、小鼠血管活性腸肽試劑盒
AF647標記的轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體
氨基丁酸轉(zhuǎn)運蛋白VGAT抗體
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspan僀?僀
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細胞表面趨化因子受體1抗原
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat glamic acid decarboxylase aoaibody (GAD-Ab) ELISA Kit 大鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒
Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 人β-促脂素(β-LPH)pcr檢測試劑盒分裝
ChickenGlucagon,GC試劑盒雞胰高血糖素(GC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞CASPASE-7蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔心臟微血管周細胞大鼠蛋白激酶G(PKG)試劑盒 ,英文名: PKG ELISA Kit
Pig angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒
病毒H5亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLPS(HumanLipopolysaccharides)ELISAKit人脂多糖/內(nèi)毒素
通用免疫化學固著溶液10毫升
ELISAKitPPP雞蛋卵黃高0蛋酸肽
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行