詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
心臟 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8457 |
細(xì)胞簡介:
兔心臟微血管周分離自心臟組織;心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官,,主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分,。心臟由心肌構(gòu)成,,左心房,、左心室、右心房,、右心室四個(gè)腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,,而不能倒流,。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),向器官,、組織提供充足的血流量,,以氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳,、無機(jī)鹽,、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能,。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,,在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明,,心肌微血管周細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能,,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,,其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長因子研究中起著重要作用,。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的兔心臟微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
兔心臟微血管周體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒,,,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒,、小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒
小鼠血管緊張素原試劑盒 小鼠血管緊張素原試劑盒 小鼠血管緊張素原試劑盒,,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素原試劑盒,、小鼠血管緊張素原試劑盒
小鼠血管緊張素試劑盒 小鼠血管緊張素試劑盒 小鼠血管緊張素試劑盒,,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管緊張素試劑盒,、小鼠血管緊張素試劑盒
小鼠血管活性腸肽試劑盒 小鼠血管活性腸肽試劑盒 小鼠血管活性腸肽試劑盒,,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:小鼠血管活性腸肽試劑盒、小鼠血管活性腸肽試劑盒
AF647標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體
氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VGAT抗體
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspan僀?僀
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat glamic acid decarboxylase aoaibody (GAD-Ab) ELISA Kit 大鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒
Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 人β-促脂素(β-LPH)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
ChickenGlucagon,GC試劑盒雞胰高血糖素(GC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-7蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔心臟微血管周細(xì)胞大鼠蛋白激酶G(PKG)試劑盒 ,,英文名: PKG ELISA Kit
Pig angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒
病毒H5亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLPS(HumanLipopolysaccharides)ELISAKit人脂多糖/內(nèi)毒素
通用免疫化學(xué)固著溶液10毫升
ELISAKitPPP雞蛋卵黃高0蛋酸肽
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行