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參考價	￥1-￥6200	/盒

產(chǎn)品簡介

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5×105cells/T25
貨號	YS-01X8467	主要用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

兔牙齦上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：G激酶錨定蛋白1抗體 RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 HIC (人小腸癌細(xì)胞) 大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 MT-4人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK7蛋白抗體 MuM-2C (人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞) 小鼠胰腺上皮細(xì)胞

詳細(xì)介紹

兔牙齦上皮細(xì)胞

兔牙齦上皮細(xì)胞

商品屬性：

組織來源	產(chǎn)品規(guī)格	細(xì)胞形態(tài)	貨號
牙齦	5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶	上皮細(xì)胞樣	YS-01X8467

細(xì)胞簡介：

兔牙齦上皮分離自牙齦組織,；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色,、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌,。牙齦邊緣稱為齦緣,，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝,。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突,。也叫齒齦，通稱牙床,；是指包住齒頸的黏膜組織,，粉紅色，內(nèi)有很多血管和神經(jīng),。牙齦上皮長期被認(rèn)為是抵御口腔中持續(xù)存在的細(xì)菌的被動免疫屏障,，隨著對牙周致病菌的不斷認(rèn)識，發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障,，上皮細(xì)胞還可以分泌抗菌多肽,，參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的第一道屏障,，在抵御牙周炎細(xì)菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用,，建立正常牙齦上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系,，將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/span>

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；

　　2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4、胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；

　　7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

　　二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；

　　2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；

　　3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；

　　4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長,；

　　5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；

　　6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

兔牙齦上皮體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。

兔牙齦上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存：

細(xì)胞傳代步驟

細(xì)胞凍存步驟

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔牙齦上皮細(xì)胞