兔腎動脈內(nèi)皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

兔腎動脈內(nèi)皮分離自腎組織,；腎臟是機體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質,，如葡萄糖、蛋白質,、氨基酸、鈉離子,、鉀離子,、等，以調(diào)節(jié)水,、電解質平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素,、促紅細胞生成素,、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進行,。腎動脈的分支為葉間動脈，穿行于腎柱內(nèi),，上行至皮質與髓質交界處,，形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發(fā)出毛細血管,，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動脈,，進入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng)，再匯集成出球小動脈,，出腎小體,。直小動脈分支形成毛細血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈,，入弓狀靜脈,、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,，注入下腔靜脈,。腎動脈既是腎的營養(yǎng)血管，又是腎的機能血管,，與腎泌尿機能密切相關,。腎動脈在腎實質內(nèi)形成兩個毛細血管網(wǎng)：腎小球毛細血管網(wǎng)，血壓較高,，利于血漿濾過形成原尿,；球后毛細血管網(wǎng)，血壓較低,，利于腎小管的重吸收,。腎動脈內(nèi)皮細胞是腎動脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用,。腎動脈內(nèi)皮細胞主要功能有：①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用,，②在腎小管的重吸收過程中起重要作用，③保持凝血和纖溶的動態(tài)平衡,。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；

　　3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液,；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

　　二、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；

　　2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗,；

　　4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；

　　5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行,。

方法簡介：

實驗室分離的兔腎動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法,、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的兔腎動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

兔腎動脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

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