詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X8408 |
細胞簡介:
兔皮層神經(jīng)元分離自腦皮層組織,;皮層神經(jīng)元細胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細胞,,它由細胞體和細胞突起構(gòu)成,。在長的軸突上套有一層鞘,,組成神經(jīng)纖維,,它的末端的細小分支叫做神經(jīng)末梢,。細胞體位于腦,、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中,。細胞體是細胞含核的部分,,其形狀大小有很大差別,直徑約4-120微米,。核大而圓,,位于細胞中央,染色質(zhì)少,,核仁明顯,。細胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì),還有許多神經(jīng)元纖維,。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分,,又可分為樹突和軸突。每個神經(jīng)元可以有一或多個樹突,,可以接受刺激并將興奮傳入細胞體,。每個神經(jīng)元只有一個軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個神經(jīng)元或其他組織,,如肌肉或腺體,。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細胞之一,,是大腦進行功能活動調(diào)節(jié)的基本單位,參與動物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程,。通過形態(tài)學觀察顯示神經(jīng)元從貼壁,、伸出突起開始;突起逐漸增多,,而后突起進一步增多并逐漸成網(wǎng),,同時細胞胞體增大,周邊光暈明顯,。10-12d細胞為豐滿,,隨后神經(jīng)元開始裂解,突起逐漸減少,,細胞已退化變性,,輪廓模糊,光暈消失,,細胞變形,。
方法簡介:
實驗室分離的兔皮層神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學試劑抑制法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔皮層神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):神經(jīng)元細胞樣
傳代特性:屬于終末分化細胞,;屬于不增殖細胞群
消化液:0.125%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
兔皮層神經(jīng)元體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit
人游離睪(F-TESTO)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit
人轉(zhuǎn)移因子(TF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit
人轉(zhuǎn)運蛋白1(TNPO1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit
S100鈣結(jié)合蛋白A12抗體
磷酸化蛋白激酶C結(jié)合蛋白2抗體
ACHE重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白 Protein
AR (Androgen Receptor 0.5mgAR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-22僀?僀
AR (Androgen Receptor 0.5mgAR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)
IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白
ACHE重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白 Protein
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標簽)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
豚鼠干擾素γ(IFNγ)試劑盒 ,,英文名: IFNγ ELISA Kit
Human calcium binding protein (CR) ELISA Kit 人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒
rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 兔子腦素/腦尿肽(BNP)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforBACE1(HumanBeta-siteAPP-CleavingEnzyme1)ELISAkit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1
線蟲果蠅轉(zhuǎn)座子Mos1熱休克誘導突變試劑盒10次
rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit兔子腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔皮層神經(jīng)元細胞兔子補體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒
Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)pcr檢測試劑盒分裝
HumanE-Selectin試劑盒人E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織S6KINASE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨細胞分化因子(ODF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行