天辰回收 島津/安捷倫1260液相色譜儀
高效液相色譜法(HPLC)具有高壓,、高效、高速,、高靈敏度,、高選擇性等特點,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥,、環(huán)保,、石化、食品,、化工等行業(yè),,是現(xiàn)在分離分析的重要方法,本文著重介紹HPLC的工作原理,、基本組成及高效液相色譜名詞術(shù)語,,使新學(xué)者快速了解高效液相色譜知識,在日常操作中理論與實踐結(jié)合,,確保HPLC的高效運行,、快速分析,。
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HPLC工作原理
100多年前植物學(xué)家Tswett(茨維特) 他將植物色素的石油醚提取液倒入裝有碳酸鈣的直立玻璃管,再加入石油醚使其自由流下,結(jié)果色素中各組份互相分離形成各種不同顏色的譜帶,Tswett用希臘語chroma(色)和graphos(譜)描述他的
實驗方法,,即現(xiàn)在的Chromatography(色譜法),。
色譜法是通過是利用混合物中各組份在不同的兩相中溶解,、分配,、吸附等化學(xué)作用性能的差異,當(dāng)兩相作相對運動時,使各組分在兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離,,色譜法的本質(zhì)是分離分析方法
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液相色譜儀是一種用液體作為流動相的色譜分離分析的方法,,是基于金典色譜的理論,使用高壓泵,、化學(xué)柱和固定相分離柱以及高靈敏度的檢測器,,液相色譜儀和氣相色譜儀之間有什么區(qū)別呢?這里小編就來給大家介紹一下,,僅供參考,希望對大家有所幫助,!
液相色譜儀和氣相色譜儀之間的區(qū)別是:1,、分析對象之間的區(qū)別
GC:適用于氣化程度高,熱穩(wěn)定性好,,沸點低的樣品;但對于沸點高,,揮發(fā)性差,熱穩(wěn)定性差,,離子和高聚物的樣品,,特別是對于大多數(shù)生化樣品而言,檢測不到20%的有機物質(zhì),。 HPLC:適用于溶解后可制成溶液的樣品(包括有機介質(zhì)溶液),它不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,它是一種分子量大,,氣化困難,熱穩(wěn)定性差的生化樣品,,聚合物和離子,。類型樣品可用于廣泛的應(yīng)用,占有機物的80%,。
2,、流動相位差異的差異GC:流動相是惰性的,氣體組分與流動相無親和力,,僅與固定相相互作用,。HPLC:流動相為液體,流動相和組分具有協(xié)同作用力,,可提高色譜柱的選擇性,,提高分離度,對分離起積極作用,。此外,,流動相有很多種,房間的選擇范圍很廣,。改變流動相的極性和pH也可以調(diào)節(jié)分離,。當(dāng)選擇具有不同比例的兩種或更多種液體作為流動相時,可以提高分離選擇性。
3.運行條件的差異GC:變暖操作,。HPLC:室溫,,高壓。
使用液相色譜儀時應(yīng)注意什么,?更換流動相時,,必須按照規(guī)定的程序進(jìn)行,否則可能會出現(xiàn)問題,,改變流動相有三種情況:互溶性的流動相的更換,、無互溶性的流動相的更換和緩沖溶液的更換,在種情況下,,使用準(zhǔn)備更換的流動相*清潔吸濾器,,然后打開儀器的排水閥并按下清洗按鈕清潔泵中的流動相。
將吸濾器放入新的流镲中并減慢流量,。清潔幾分鐘后,,關(guān)閉排水閥。接下來清潔色譜柱和檢測器池,,直到基線穩(wěn)定,。對于第二種情況,首先使用與新舊流動相兼容的中間清潔溶液進(jìn)行清潔,,然后使用新的流動相進(jìn)行清潔,,與種情況相同。對于第三種情況,,應(yīng)使用蒸餾水作為中間清潔溶液,,然后使用新的流動相清洗。
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