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無外泌體胎牛血清 FBS050-EXO
名稱:無外泌體胎牛血清
貨號(hào): FBS050-EXO
規(guī)格:50ML
品牌:WINSERA
活動(dòng)詳情:
2025年歡度“五一"特惠活動(dòng)持續(xù)至2025年7月1日
特惠價(jià)格980元/瓶
無外泌體血清產(chǎn)品應(yīng)用:
大多數(shù)細(xì)胞的生長(zhǎng)所需的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基,都需要添加胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)作為其生長(zhǎng)所需補(bǔ)充物,。但是,F(xiàn)BS 來源于牛血清,,其中天然含有大量的包括外泌體(exosome)在內(nèi)的外源性細(xì)胞外囊泡(extracellular vesicles),。exosome 其內(nèi)含有的蛋白質(zhì)與核酸分子包括 mRNA、miRNA,、rRNA 和 snoRNA 等,exosome 所含成份與其細(xì)胞來源密切相關(guān),,這也決定了 exosome 的功能特異性,。但是,F(xiàn)BS 相關(guān)的 RNA 會(huì)在分離細(xì)胞外膜泡 RNA(exRNA)時(shí)一同被分離出來,,這會(huì)對(duì)下游 RNA 分析造成干擾,。因此,,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過程中采取減少 FBS 源 RNA 干擾的預(yù)防措施是非常必要的。
無外泌體血清適用外泌體研究,。
蘇州千舍同期熱賣產(chǎn)品:
特級(jí)胎牛血清 FBS500-WP-002 500ML
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外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),現(xiàn)今,,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。為細(xì)胞間通訊的重要媒介,它像一個(gè)信使,,為細(xì)胞與胞外環(huán)境傳遞信息,,保障機(jī)體的正常工作,。
外泌體的分離方法這么多,,選擇哪種更好?
答:外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問題,,獲得高純度的外泌體對(duì)后續(xù)的研究至關(guān)重要,。據(jù)了解,目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠、 超濾,、 沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離:
1,、 超速離心法(差速離心)超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行( 如圖所示) ,,可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,,但過程比較費(fèi)時(shí),,且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),,純度也受到質(zhì)疑;此外,,重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,,從而降低其質(zhì)量。
2,、密度梯度離心在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,,是一種區(qū)帶分離法,。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在 1.13-1.19g/ml
的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,,耗時(shí),。
3、超濾離心由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,,大于一般蛋白質(zhì),,利用不同截留相對(duì)分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離,便可獲得外泌體,。超濾離心法簡(jiǎn)單高效,且不影響外泌體的生物活性,,是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法,。
4、磁珠免疫法外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如 CD63,、 CD9 蛋白),,用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高,、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,,外泌體生物活性易受 pH 和鹽濃度影響,,不利于下游實(shí)驗(yàn),,難以廣泛普及。
5,、PEG-base 沉淀法聚乙二醇( PEG)可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,,其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,,雜蛋白較多( 假陽(yáng)性),,顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,,機(jī)械力或者吐溫-20 等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,,因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。
6,、 試劑盒提取近幾年來,,市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,有的是通過特殊設(shè)計(jì)的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分,,有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,,也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。
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