SD 大鼠頸椎脫臼法處死,，75%乙醇浸泡 1～2 分鐘，2 次,，置超凈臺(tái)內(nèi),，打開(kāi)腹腔取出腎臟剪碎，置含 Hank's 液的無(wú)菌培養(yǎng)皿洗滌,，置 80 目不銹鋼篩網(wǎng)上,。

用扁平自制小鏟輕輕碾磨產(chǎn)物微小組織透過(guò)篩網(wǎng)，濾過(guò)組織 Hank's 液混合物用吸管吸至120目不銹鋼篩網(wǎng),，濾過(guò),，去小組織塊,，濾過(guò)物吸至200目不銹鋼篩網(wǎng)，輕輕濾過(guò),， Hank's液洗滌 次,， 收集網(wǎng)上腎小球， 鏡下觀察為分離良好的腎小球,。腎小球用 0.2%胰酶、0.1%膠原酶,，37℃消化20 分鐘,，加血清終止胰酶反應(yīng)，離心除去膠原酶,。處理過(guò)的腎小球計(jì)數(shù)后接種至24孔培養(yǎng)板或25ml培養(yǎng)瓶,，使腎小球大于60個(gè)/cm2，加培養(yǎng)基5～10ml（培養(yǎng)基組成：F12—3T3 上清 1：1,；5% 馬血清,；2.5%胎牛血清；胰島素 5μg/ml,；25ng/ml 氫化松,；5μg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白；25ng/ml 前列腺素 E1,；甲狀腺素 0.02ng/ml,；D-纈氨酸 150ng/ml）腎小球培養(yǎng) 8～10 天，去除腎小球未生長(zhǎng)組分,，細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng) 24 小時(shí),，形態(tài)學(xué)觀察：細(xì)胞生長(zhǎng)成單層多角型細(xì)胞，直徑約 100μm,。