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細胞復蘇注意事項
?復蘇時動作要快,,盡量減少胞內(nèi)形成冰晶,影響復蘇后細胞活率,。
? 融化時盡量不要碰到管口,,以免容易造成污染。
?若一次性需要復蘇細胞很多,,可以分批水浴解凍,,防止傳熱不佳使得細胞融化時間延長。
?若需要同時復蘇好幾種細胞,,提前在離心管和培養(yǎng)瓶上做好標記,,或記住自己擺放的位置,不要弄混亂,。
4,、何判定細胞是否發(fā)生支原體污染:可以選用直接培養(yǎng)法、熒光染色或PCR方法檢測,,比較常用的是PCR,。當細胞發(fā)生支原體污染時,原則上是能夠去除支原體的,,但是整個過程耗時耗力,,還要考驗個人操作能力。所以如果不是處于細胞存量很少的情況下,,建議發(fā)現(xiàn)污染時立刻棄掉,,重新培養(yǎng),。
5,、如果孵箱中只是某種細胞持續(xù)性大量死亡,,而其他細胞狀態(tài)都沒問題的話,基本上可以確定就是孵箱存在特異性感染這類細胞的真菌或細菌,,遇到這種情況,,小六兒也不知道該怎么做,只能是先停一段時間看看,。,。。,。,。。
5,、其他注意事項:每個星期都要更換孵箱底盤中的水(紫外照射后超純水),;每兩周消毒一次孵箱:75%酒精擦拭一遍后,再用0.1%新潔爾滅擦拭一遍(都用超純水配制),;可以在孵箱底部放一個燒杯,,里面放入飽和硫酸銅,可以抑制霉菌生長,。不過也有人說硫酸銅會改變孵箱的PH值,,如果不是孵箱污染的情況很嚴重,建議不要使用,。
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