細胞培養(yǎng)做為生物學(xué)研究最基礎(chǔ)的技術(shù)之一,，可以說是滲透科研界的方方面面,。工欲善其事，必先利其器,。細胞好不好,，就看你懂不懂細胞培養(yǎng)的各種技術(shù)了。

?  原代培養(yǎng)

從原代組織中分離細胞的常用的方法是酶解法（胰蛋白酶和膠原酶）,。

用無菌的解剖刀和剪子將組織剪成3~4mm小片,，用平衡液（無鈣鎂離子）清洗組織碎片后去除上清液，并加入0.25%的胰蛋白酶（Trypsin,，100mg組織加入1ml胰蛋白酶）或者膠原酶（Collagenase,，50~200單位/ml），孵育4-18h,。離心取上清后,，用平衡液清洗幾次后，用*培養(yǎng)基懸浮細胞,，進行培養(yǎng),。

?  傳代培養(yǎng)

依據(jù)細胞生長的特點，傳代方法有3種：

1. 懸浮生長細胞傳代（離心法）

將懸浮細胞離心（1000 rpm,， 3 min）去上清,，收集沉淀物加新培養(yǎng)基，混勻后進行傳代培養(yǎng),。

2. 半懸浮生長細胞傳代（直接吹打法）

此類細胞（如Hela細胞）部分貼壁，但黏貼不牢,，可用直接吹打法使細胞從瓶壁上脫落下來,，進行傳代。

3. 貼壁生長細胞傳代（酶消化法）

去除瓶內(nèi)培養(yǎng)液后,，加入1-2ml 0.25%的胰蛋白酶液（以消化液覆蓋整個瓶底為準）37℃靜置2-10min（顯微鏡下動態(tài)監(jiān)測）,。移去蛋白酶液，加入培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁細胞,，離心將細胞沉淀用培養(yǎng)液制成細胞懸液,。吸取1/10—1/40細胞懸液，接種于含有適量新鮮培養(yǎng)液的新培養(yǎng)瓶中進行傳代培養(yǎng),。

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細胞培養(yǎng)是一個不斷進步的過程,，在平時做好積累，量變才會有質(zhì)變,。