蘇州千舍生物教你如何選擇培養(yǎng)基和血清

細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里常規(guī)和基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)了,，但卻不是簡單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng),，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。有時候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染,、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多,，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起,。 

經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，GIBCO,、HyClone,、Sigma等。其中DMEM,、RPMI-1640,、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基,。其他如M199,、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng),。 

◆ MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,，其中增加了組分的范圍及濃度。 

◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計的,，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),。

◆ DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍,，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用,。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細(xì)胞的生長需要,，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,，這就是大家常說的低糖和高糖了。 

Hyclone胎牛血清SH30084.03  ,、Hyclone胎牛血清SH30406.02  ,、Hyclone胎牛血清SH30406.05 、Hyclone胎牛血清SH30396.03  ,、Hyclone胎牛血清SH30070.03

特級胎牛血清 SH30070.03E ,、Hyclone胎牛血清 SH30370.03  ,、活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03  、活性炭/葡聚糖處理胎牛血清,，熱滅活 SH30068.03HI ,、馬血清SH30074.03  、烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03 ,、Hyclone胎牛血清SH30071.03 ,、Hyclone胎牛血清SV30160.03。

BOVOGEN胎牛血清 SFBS ,、BOVOGEN新生牛血清 SNCS,。

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101 、PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151,。

BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS 、BI ES級別胎牛血清 04-002-1A ,、

BI 間充質(zhì)胎牛血清 04-400-1A ,。

Corning胎牛血清 35-076-CV。

PAN胎牛血清FBS P30-3302  ,、PAN胎牛血清FBS ST30-3302 ,、PAN ES級別胎牛血清 ST30-2602 、PAN胎牛血清Plus ST30-3302P ,。

NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE,。

Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108 、Gemini特級胎牛血清 100-500  ,、Gemini科研用人AB血清100-512 ,。

TCB胎牛血清 101ZC。

Sigma 特級胎牛血清F2442 ,、Sigma正常人AB血清 H4522 ,。

SBI 無外泌體血清 EXO-FBS-50A-1

胎牛血清盒裝A31608-02、馬血清16050-122,。

雙抗15140-122,、SV30010。

胰酶 25200-056,、SH30042.01 ,、GIBCO 胰酶 25200-072。

MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株

HCT8/5-fu 人回腸直腸腺癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株

LOVO/5-FU 人結(jié)腸癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株

HCT116/L人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細(xì)胞

HL60/ADR人早幼粒急性白血病細(xì)胞耐阿霉素株

PC9GR(PC9R)人肺癌細(xì)胞耐吉非替尼

LOVO/ADR人結(jié)腸癌細(xì)胞阿霉素耐藥株

HNE1/DDP人鼻咽癌細(xì)胞順鉑耐藥株

SGC7901/5-fu人胃癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株

A549/DDP人肺癌細(xì)胞順鉑耐藥株

MCF-7/DDP人乳腺癌細(xì)胞順鉑耐藥株

A549/ADR人肺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株

SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞順鉑耐藥株

SKOV3/DDP人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株

HELA/DDP人宮頸癌耐順鉑細(xì)胞株

NCI-H1650 人肺支氣管癌細(xì)胞

RT4 人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤 ,、SK-N-MC 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞

SK-N-SH 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 ,、SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞

T98G 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 、U251MG(KO) 人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞

U266 人骨髓瘤細(xì)胞 ,、VCAP 人前列腺癌細(xì)胞

hTERT-HPNE 人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞 ,、ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞

NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 ,、H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

HACAT 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 、HCT116 人結(jié)腸癌細(xì)胞

HEK293 人胚腎細(xì)胞  ,、HEPG2 人肝癌細(xì)胞

HGC27 人胃癌細(xì)胞(未分化) ,、HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞

HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 、KYSE150人食道癌細(xì)胞

L02(HL7702)人正常肝細(xì)胞   ,、LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞

MCF-10A人正常乳腺上皮細(xì)胞 ,、MCF7人乳腺癌細(xì)胞

LX-2 人肝星狀細(xì)胞 、MDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞

◆ aMEM含有附加的氨基酸,、維生素以及核苷和脂肪酸,，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞,。 

◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計的,，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。 

◆ RPMI-1640培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計的,，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng),。 

以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過程就較為繁瑣,，要溶解,、調(diào)pH值，過濾,，過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差,，而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會有差異,。如果使用液體培養(yǎng)基,，這種人為的誤差會減少，因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的,，批間差會很小,。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多，以前是這樣,，但現(xiàn)在非也,。HyClone和Invitrogen都在國內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的生產(chǎn)基地，生產(chǎn)和運(yùn)輸成本大幅降低,，所以現(xiàn)在的價格也只是50-60元/500ml,，比干粉培養(yǎng)基貴不了多少，而且還幫你省了過濾器和時間,。 

血清含有生長因子可促進(jìn)細(xì)胞的繁殖,，含有附著因子可促進(jìn)細(xì)胞的貼壁,，同時還具有抗胰酶活性。血清同時也是礦物質(zhì),、脂類及激素的來源,。zui常用的血清有小牛血清、新生牛血清,、胎牛血清和馬血清等,。牛血清是按照采血時間的早晚來分類的。采血時間越早,，營養(yǎng)物質(zhì)越豐富,，所含抗體也越少，因而胎牛血清適合要求高的細(xì)胞系和克隆化培養(yǎng),。由于瘋牛病的原因,，到目前為止，我國政府仍然禁止從北美洲,、歐洲和日本等地區(qū)進(jìn)口牛血清,，因此市面上的牛血清大多來自澳洲、南美洲,，或是國產(chǎn)的。  而血清批次間的差別就是不可避免的,，這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法,、動物的年齡差別及血清的儲存條件等，而且與取血動物的來源關(guān)系密切,。不同的牧場,、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量。因此選好了一種血清就要盡可能長期使用它,。在需要更換時,，也要盡量保持與原有的一批血清相似。

現(xiàn)在很多公司都提供血清預(yù)留,，你一旦選定了某個批次的血清,，zui好備足一年的量，這樣可以避免很多麻煩,。血清固然是細(xì)胞培養(yǎng)中*的成分,，但正如上文所說，血清的批間差異大,，更換血清時需要做大量的測試以取保替換的血清與原來的相似,。而血清的供應(yīng)也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病的影響,，說不定哪天血清就突然沒得賣了,，那對實(shí)驗(yàn)的影響可非同小可,。另外，血清的價格也很昂貴,，雖說現(xiàn)在也有便宜的國產(chǎn)血清,，但是高品質(zhì)的澳洲血清價格仍舊高起。因此,，也有一些實(shí)驗(yàn)室開始換用無血清培養(yǎng)基,。