蘇州千舍生物教你如何解決“細(xì)胞空泡化”

“細(xì)胞空泡化”在細(xì)胞培養(yǎng)中也是一個常見問題，它的出現(xiàn)原因有多種,，實(shí)驗(yàn)人員碰到往往會很頭疼,。

在文章中小給列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因，方便大家進(jìn)行分析選擇解決的方法,。

一,、可以引起細(xì)胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些？

1.細(xì)胞老化

原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況,，是有些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài),，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡,。

傳代細(xì)胞出現(xiàn)這種狀況比較少見,，出現(xiàn)的原因一般都是因?yàn)榧?xì)胞傳代次數(shù)過多，老化嚴(yán)重,。

2.PH值

培養(yǎng)液的PH值與細(xì)胞正常所需PH值差別太大,。

3.胰酶消化

 胰酶消化時間過長，會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)受損,，有時也會出現(xiàn)這種情況,。除此之外，還有一個大家容易忽略的問題,在香港的一家科研機(jī)構(gòu)表明如果消化細(xì)胞吹打時力度過大,，產(chǎn)生太多氣泡,，長期存在也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象,。

4.自噬

細(xì)胞缺乏營養(yǎng)導(dǎo)致饑餓誘導(dǎo)形成自噬也會形成空泡化，但是這種空泡在光學(xué)顯微鏡下是看不到的,，只有在電鏡下才能觀察到,。

5.細(xì)胞代謝

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，由于血清濃度不夠,、藥物作用,、外界刺激等情況下導(dǎo)致細(xì)胞代謝出現(xiàn)問題，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀況下會出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的情況,。

6.污染

衣原體感染：一旦一些細(xì)胞出現(xiàn)空泡化,，繼續(xù)培養(yǎng)，空泡范圍會擴(kuò)大,，即使傳代后也如此，出現(xiàn)這種情況,，細(xì)胞基本無法挽救,。后來檢測發(fā)現(xiàn)，此種細(xì)胞存在衣原體的感染,。

支原體污染：支原體污染在不嚴(yán)重的時候細(xì)胞是沒有什么明顯癥狀的,，而且也無法通過光學(xué)顯微鏡觀察到，只有在嚴(yán)重的時候會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)變差,，出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象,，細(xì)胞膜上也會出現(xiàn)小黑點(diǎn)附著。

病毒污染：在文獻(xiàn)上也有說病毒污染也會導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)空泡化的情況,。

Hyclone胎牛血清SH30084.03  ,、Hyclone胎牛血清SH30406.02  、Hyclone胎牛血清SH30406.05 ,、Hyclone胎牛血清SH30396.03  ,、Hyclone胎牛血清SH30070.03

特級胎牛血清 SH30070.03E 、Hyclone胎牛血清 SH30370.03  ,、活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03  ,、活性炭/葡聚糖處理胎牛血清，熱滅活 SH30068.03HI ,、馬血清SH30074.03  ,、烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03 、Hyclone胎牛血清SH30071.03 ,、Hyclone胎牛血清SV30160.03,。

BOVOGEN胎牛血清 SFBS 、BOVOGEN新生牛血清 SNCS,。

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101 ,、PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151,。

BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS 、BI ES級別胎牛血清 04-002-1A ,、

BI 間充質(zhì)胎牛血清 04-400-1A ,。

Corning胎牛血清 35-076-CV。

PAN胎牛血清FBS P30-3302  ,、PAN胎牛血清FBS ST30-3302 ,、PAN ES級別胎牛血清 ST30-2602 、PAN胎牛血清Plus ST30-3302P ,。

NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE,。

Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108 、Gemini特級胎牛血清 100-500  ,、Gemini科研用人AB血清100-512 ,。

TCB胎牛血清 101ZC。

Sigma 特級胎牛血清F2442 ,、Sigma正常人AB血清 H4522 ,。

SBI 無外泌體血清 EXO-FBS-50A-1

胎牛血清盒裝A31608-02、馬血清16050-122,。

雙抗15140-122,、SV30010  、胰酶 25200-056,、SH30042.01 ,、GIBCO 胰酶 25200-072。

MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株

HCT8/5-fu 人回腸直腸腺癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株

LOVO/5-FU 人結(jié)腸癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株

HCT116/L人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細(xì)胞

HL60/ADR人早幼粒急性白血病細(xì)胞耐阿霉素株

PC9GR(PC9R)人肺癌細(xì)胞耐吉非替尼

LOVO/ADR人結(jié)腸癌細(xì)胞阿霉素耐藥株

HNE1/DDP人鼻咽癌細(xì)胞順鉑耐藥株

SGC7901/5-fu人胃癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株

A549/DDP人肺癌細(xì)胞順鉑耐藥株

MCF-7/DDP人乳腺癌細(xì)胞順鉑耐藥株

A549/ADR人肺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株

SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞順鉑耐藥株

SKOV3/DDP人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株

HELA/DDP人宮頸癌耐順鉑細(xì)胞株

NCI-H1650 人肺支氣管癌細(xì)胞

RT4 人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤 ,、SK-N-MC 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞

SK-N-SH 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 ,、SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞

T98G 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 、U251MG(KO) 人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞

U266 人骨髓瘤細(xì)胞 ,、VCAP 人前列腺癌細(xì)胞

hTERT-HPNE 人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞 ,、ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞

NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 、H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

HACAT 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 ,、HCT116 人結(jié)腸癌細(xì)胞

HEK293 人胚腎細(xì)胞  ,、HEPG2 人肝癌細(xì)胞

HGC27 人胃癌細(xì)胞(未分化) 、HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞

HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 ,、KYSE150人食道癌細(xì)胞

L02(HL7702)人正常肝細(xì)胞   ,、LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞

MCF-10A人正常乳腺上皮細(xì)胞 、MCF7人乳腺癌細(xì)胞

LX-2 人肝星狀細(xì)胞 ,、MDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞

二,、遇到細(xì)胞空泡化我們應(yīng)該如何解決？

1.如果是因?yàn)榧?xì)胞老化的原因,，可以通過復(fù)蘇代數(shù)靠前的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),。

2.如果是培養(yǎng)液PH的問題,，可以通過更換培養(yǎng)液調(diào)整到合適的PH值，再進(jìn)行培養(yǎng),。

3.在傳代時,，要選用合適濃度的胰酶和選取適當(dāng)?shù)南瘯r間進(jìn)行消化，在操作時避免吹打太過用力出現(xiàn)太多氣泡,。

4.要保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)充足,，可以通過增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決。

5.盡量使用質(zhì)量好和渠道正規(guī)的胎牛血清,，因?yàn)檫@樣的血清營養(yǎng)豐富且外源刺激因子少,，可以有效的避免出現(xiàn)這類問題。

6.在細(xì)胞培養(yǎng)時要嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,，操作時要規(guī)范,，減少污染的可能性?？梢酝ㄟ^試劑盒檢測細(xì)胞是否污染,，對于已經(jīng)污染的細(xì)胞滅菌后直接處理，避免污染其他細(xì)胞,。