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培養(yǎng)微生物的方法步驟

閱讀:2627      發(fā)布時間:2022-6-22
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  微生物培養(yǎng)所培養(yǎng)的微生物通常是病菌、細菌,、放線菌,、真菌等,屬于生物培養(yǎng)的一種,。
 
  微生物培養(yǎng)步驟:
 
  1.配置不同濃度的營養(yǎng)液稀釋液:取營養(yǎng)液1ml溶于9ml無菌水中,振蕩 5min配成10%的溶液.
 
  2.將容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.
 
  3.將試管口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養(yǎng)皿中,在各培養(yǎng)皿上標上濃度.
 
  4.將有細菌生長的樣品容器口靠近(注意不是對著)酒精燈燈焰,用接種環(huán)挑取菌落上的少量菌體加入10%的營養(yǎng)液中.把接種環(huán)放在酒精燈上灼燒滅菌,再次取樣加入盛1%的營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰)中.重復這個操作,將各濃度的營養(yǎng)液接上種.
 
  5.輕輕搖勻接上種的培養(yǎng)皿,置于恒溫箱內37攝氏度保存,3天后就有菌落出現.
 
  微生物培養(yǎng)的基本條件:
 
  1,、影響微生物生長的因素
 
  微生物的生長,除了受本身的遺傳特性決定外,,還受到外界許多因素的影響,。影響微生物生長的因素很多,簡要介紹如下,。
 
  1) 營養(yǎng)物濃度
 
  細菌的生長率與營養(yǎng)物的濃度有關:μ=μmax*C/(K+C) ,,營養(yǎng)物濃度與生長率的關系曲線是典型的雙曲線。
 
  K值是細菌生長的很基本的特性常數,。它的數值很小,,表明細菌所需要的營養(yǎng)濃度非常之低,所以在自然界中,,它們到處生長,。然而營養(yǎng)太低時,細菌生長就會遇到困難,,甚至還會死亡,。這是因為除了生長需要能量以外,細菌還需要能量來維持它的生存。這種能量稱為維持能,。另一方面,,隨著營養(yǎng)物濃度的增加,生長率愈接近最大值,。
 
  2)溫度
 
  在一定的溫度范圍內,,每種微生物都有自已的生長溫度三基點:最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度,。在生長溫度三基點內,,微生物都能生長,但生長速率不一樣,。微生物只有處于最適生長溫度時,,生長速度才最快,代時最短,。超過最低生長溫度,,微生物不會生長,溫度太低,,甚至會死亡,。超過最高生長溫度,微生物也要停止生長,,溫度過高,。也會死亡。一般情況下,,每種微生物的生長溫度三基點是恒定的,。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化。
 
  根據微生物最適生長溫度的不同,,可將它們分為三個類型:
 
  a.嗜冷微生物:其是適生長溫度多數在-10℃-20℃之間
 
  b.中溫微生物:其最適生長溫度一般在20℃-45℃之間
 
  c.嗜熱微生物:生長溫度在45℃以上,。
 
  3)水分
 
  水分是微生物進行生長的必要條件。芽孢,、孢子萌發(fā),,首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的,。但是微生物只能在水溶液中生長,而不能生活在純水中,。各種微生物在不能生長發(fā)育的水分活性范圍內,,均具有狹小的適當的水分活性區(qū)域。
 
  4)氧氣
 
  按照微生物對氧氣的需要情況,,可將它們分為以下五個類型,。
 
  a.需氧微生物:這類微生物需要氧氣供呼吸之用。沒有氧氣,便不能生長,,但是高濃度的氧氣對需氧微生物也是有毒的,。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長。絕大多數微生物都屬于這個類型,。

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